本文關(guān)鍵詞：兩種方法分離免疫細(xì)胞用于高通量測序TCR組庫分析的比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討兩種方法分離免疫細(xì)胞進(jìn)行高通量T細(xì)胞表面的T細(xì)胞變體(TCR),組庫分析的區(qū)別及可行性。方法分別采用免疫磁珠分選純化CD3陽性T細(xì)胞和Ficoll-Paque梯度離心法分離外周血淋巴細(xì)胞的方法制備TCR測序所需樣品各1例,提取DNA后多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增CDR3區(qū)域,將擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物純化后構(gòu)建免疫組庫,進(jìn)行高通量測序及生物信息學(xué)分析。結(jié)果兩種方法獲得的免疫細(xì)胞提取DNA后均能夠滿足TCR免疫組庫建庫需要,高通量測序結(jié)果顯示互補(bǔ)決定簇3(CDR3)區(qū)域長度呈高斯分布,來自健康志愿者的TCR具有豐富多樣性,腫瘤患者TCR多樣性呈寡克隆分布。結(jié)論純化的T細(xì)胞或者直接分離得到的淋巴細(xì)胞均可用于免疫組庫構(gòu)建及后續(xù)TCR CDR3受體庫高通量測序分析,TCR CDR3多樣性可能直接反應(yīng)機(jī)體免疫狀態(tài)。
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院腫瘤內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： T細(xì)胞受體 高通量測序 互補(bǔ)決定簇
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(C81172534)
【分類號】：R392
【正文快照】： T細(xì)胞表面的T細(xì)胞受體(T cell receptor,TCR)是識別抗原的關(guān)鍵分子,具有龐大的多樣性,以適應(yīng)對于不同抗原的識別。TCR最大量多樣性的產(chǎn)生主要來自于連接時(shí),在V(D)J連接區(qū)核苷酸的插入和刪除,體現(xiàn)為互補(bǔ)決定區(qū)簇3(complementarydetermining region 3,CDR3)序列多樣性,因此,TCR

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 ;Analysis of the CDR3 Length Repertoire and the Diversity of TCRα Chain in Human Peripheral Blood T Lymphocytes[J];Cellular & Molecular Immunology;2007年03期

2 王鵬;賀曉燕;王小妹;姚新生;;T細(xì)胞TCR CDR3受體庫的高通量測序分析概況[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2011年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 周建偉;高素平;孔翠;史碩;;TCRβ鏈CDR3譜系與病毒感染相關(guān)研究進(jìn)展[J];濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年06期

2 張蒙;王倚天;謝良富;蔡志明;吳松;;腫瘤免疫組庫研究促進(jìn)癌癥疫苗研究[J];生命科學(xué);2015年02期

3 李志峰;宋方洲;周全華;馮連貴;凌華;張敏;;“熒光定量PCR溶解曲線法”監(jiān)測HIV感染者TCR α鏈CDR3譜系漂移的研究[J];中國病原生物學(xué)雜志;2010年07期

4 孫永蘋;湯賢英;朱紅倩;楊雪峰;姚新生;;一例彌漫性大B淋巴細(xì)胞瘤組織樣本T細(xì)胞TCR α/β CDR3譜序的初步分析[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年02期

5 張?zhí)?孫素紅;;高通量測序技術(shù)檢測T&B細(xì)胞CDR3受體庫在臨床中的應(yīng)用[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2014年09期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 溫博;基于流式細(xì)胞術(shù)的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 賀曉燕;CE&HTS技術(shù)初步分析母子間外周血T細(xì)胞TRBV F&P基因家族CDR3組成和特征[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2011年

2 伍紹強(qiáng);CHB患者外周血及肝組織中T淋巴細(xì)胞受體β鏈互補(bǔ)決定區(qū)3譜系分析[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2010年

3 姚文娟;豬瘟病毒C株感染前后豬αβTCR變化動態(tài)與分子結(jié)構(gòu)組成特征研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

4 王騰;GeXP多基因遺傳表達(dá)系統(tǒng)檢測人TCRVα和TCRVβ鏈CDR3譜型及長度的方法建立以及初步應(yīng)用[D];廣東藥學(xué)院;2013年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 姚新生;周明乾;馬驪;羅微;馮曉勤;溫茜;王小寧;;外周造血干細(xì)胞移植后及出現(xiàn)GVHD時(shí)T細(xì)胞β鏈CDR3譜型分析[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2008年04期

2 姚新生,王小寧;外周T細(xì)胞TCR基因的重排(編輯/修正)與選擇[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2005年03期

3 ;Expression of recombination-activating genes and T cell receptor gene recombination in the human T cell leukemia cell line[J];Chinese Medical Journal;2007年05期

4 馬大龍;免疫組學(xué):21世紀(jì)免疫學(xué)家的新挑戰(zhàn)[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2005年09期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊燕軍;;調(diào)控免疫細(xì)胞的新方法[J];國外醫(yī)學(xué)情報(bào);2001年02期

2 周建,劉磊,蔣春雷,陳宜張;甾體激素對免疫細(xì)胞快速作用的非基因組機(jī)制[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2004年02期

3 周淑君;致病性自由生活阿米巴:免疫細(xì)胞學(xué)論證和蟲種鑒定[J];國外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊);1985年06期

4 李康生,楊貴貞;免疫細(xì)胞促腎上腺皮質(zhì)激素受體分布特性[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;1992年01期

5 朱曉萍,吳振裘,李秀忠,許德風(fēng);血管性原免疫細(xì)胞淋巴腺病一例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J];寧夏醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1998年01期

6 聶鳳珍;;HIV產(chǎn)生一種有助于它增殖的蛋白[J];國外醫(yī)學(xué)情報(bào);1998年03期

7 艾新;;背療可激活免疫細(xì)胞[J];家庭科技;2006年05期

8 ;免疫細(xì)胞：癌癥福音?[J];新世紀(jì)周刊;2007年25期

9 婁雪林,何立銘,龔非力,于曉,徐濤,周專;免疫細(xì)胞分泌研究進(jìn)展[J];生理學(xué)報(bào);2002年03期

10 魏雪飛,許賢豪,張華,國紅,喬立艷,殷劍,矯毓娟,侯世芳,劉江紅;免疫細(xì)胞的冷凍保存[J];中國神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志;2003年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周娟;陳龍;曹萌;蔣英子;高偉;;鎘負(fù)荷大鼠血漿某些免疫介質(zhì)水平及脾臟免疫細(xì)胞活性變化[A];中國生理學(xué)會第六屆全國青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2003年

2 白軼;賈俊;孫志軍;趙怡芳;;淋巴管畸形中免疫細(xì)胞團(tuán)塊的研究[A];2007'全國口腔頜面部脈管性疾病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2007年

3 呂占軍;王秀芳;侯潔;;不同發(fā)育階段免疫細(xì)胞高表達(dá)基因大小的比較[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

4 黃文州;陳梅生;;免疫細(xì)胞系列治療儀的發(fā)明回顧[A];中國儀器儀表學(xué)會醫(yī)療儀器分會2010兩岸四地生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)術(shù)年會論文集[C];2010年

5 王小寧;;Intosis，，免疫細(xì)胞死亡的新機(jī)制?[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

6 關(guān)雪;關(guān)秀茹;;動脈粥樣硬化的免疫細(xì)胞和自身抗原研究進(jìn)展[A];2012全國臨床微生物與感染免疫學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

7 姜玉玲;蔣麗鑫;;動脈粥樣硬化的免疫細(xì)胞和自身抗原的研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

8 劉曉萍;于業(yè)軍;王躍軍;;扇貝多肽對免疫細(xì)胞活性及其功能的影響[A];加入WTO和中國科技與可持續(xù)發(fā)展——挑戰(zhàn)與機(jī)遇、責(zé)任和對策（下冊）[C];2002年

9 石炳毅;;調(diào)節(jié)性免疫細(xì)胞在移植領(lǐng)域的臨床轉(zhuǎn)化研究[A];2013中國器官移植大會論文匯編[C];2013年

10 吳紅英;王月英;李德冠;張恒;路璐;王小春;王彥;褚麗萍;張俊玲;孟愛民;;IRM-2小鼠免疫細(xì)胞功能測定[A];中國環(huán)境誘變劑學(xué)會第14屆學(xué)術(shù)交流會議論文集[C];2009年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 常麗君;用藥物調(diào)節(jié)特殊免疫細(xì)胞可控制腫瘤生長[N];科技日報(bào);2013年

2 實(shí)習(xí)生 鄭瑩瑩 記者 馬飛;免疫細(xì)胞儲存：先行者大膽布局[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

3 本報(bào)記者 王志靈;開能環(huán)保12億元豪賭免疫細(xì)胞：從實(shí)驗(yàn)室到市場勝算多少？[N];21世紀(jì)經(jīng)濟(jì)報(bào)道;2014年

4 華凌;飲食或藥物可使免疫細(xì)胞“煥發(fā)青春”[N];科技日報(bào);2014年

5 本報(bào)實(shí)習(xí)記者 曹學(xué)平;跨界免疫細(xì)胞 開能環(huán)保講故事？[N];中國經(jīng)營報(bào);2014年

6 記者 耿挺;鈣離子“點(diǎn)燃”免疫細(xì)胞“烽火臺”[N];上�？萍紙�(bào);2012年

7 北京朝陽醫(yī)院肝病科主任 姚鵬;抗癌免疫細(xì)胞進(jìn)化史[N];健康報(bào);2013年

8 許琦敏;“長壽”免疫細(xì)胞帶來健康隱患[N];文匯報(bào);2007年

9 錢錚;科學(xué)家在小腸上,發(fā)現(xiàn)了免疫細(xì)胞[N];新華每日電訊;2008年

10 華凌;激活大腦免疫細(xì)胞可修復(fù)受損腦組織[N];科技日報(bào);2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 王珊;免疫細(xì)胞細(xì)胞胞內(nèi)死亡特征及機(jī)制研究[D];華南理工大學(xué);2012年

2 宋春輝;模擬HCV HVR1免疫7肽對人不同免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子影響的初步研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

3 胡亮杉;植物多酚提高CD34~+早期急性髓系白血病細(xì)胞被活化免疫細(xì)胞殺傷的敏感性[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

4 徐鵬輝;腸黏膜上皮細(xì)胞與免疫細(xì)胞相互作用的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

5 劉映霞;重型乙型肝炎免疫細(xì)胞差異表達(dá)基因研究[D];中南大學(xué);2003年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 梁傳宇;免疫細(xì)胞輻射誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的研究[D];長春工業(yè)大學(xué);2011年

2 閉書文;重癥手足口病中樞神經(jīng)系統(tǒng)免疫細(xì)胞的分布、數(shù)量及意義[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

3 張穎;雜色曲霉素對小鼠免疫細(xì)胞的細(xì)胞因子影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

4 王玉葉;重組hIFN-α-2b-BCG對人外周血免疫細(xì)胞鐘樣蛋白受體表達(dá)調(diào)節(jié)及其抗腫瘤作用的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

5 王永祥;TIPE2在鼠動脈硬化斑塊和人多種組織細(xì)胞中的表達(dá)及其意義[D];山東大學(xué);2009年

6 吳正中;Pristane誘導(dǎo)小鼠狼瘡模型的建立及其免疫細(xì)胞功能變化的研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2013年

  本文關(guān)鍵詞：兩種方法分離免疫細(xì)胞用于高通量測序TCR組庫分析的比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：412454