人羊膜間充質(zhì)干細胞抑制異體淋巴細胞增殖并減少γ干擾素的分泌
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【摘要】:目的觀察人羊膜間充質(zhì)干細胞(hAMSC)對體外培養(yǎng)的淋巴細胞功能的影響。方法通過酶消化法分離培養(yǎng)hAMSC,采用熒光團標記的小鼠抗人單克隆抗體結(jié)合流式細胞術(shù)鑒定細胞表面抗原;免疫熒光染色檢測培養(yǎng)細胞波形蛋白(vimentin)和階段特異表達抗原4(SSEA-4)的表達;分離培養(yǎng)hAMSC和外周血單個核細胞(PBMC),將刀豆蛋白(ConA)刺激的淋巴細胞與1×104、5×104、1×105個hAMSC進行共培養(yǎng)。CCK-8法測定淋巴細胞增殖,ELISA測定細胞上清液中IFN-γ的水平。結(jié)果5μg/mLConA能夠引起淋巴細胞增殖;共培養(yǎng)條件下,hAMSC能夠抑制ConA引起的淋巴細胞增殖,且隨著hAMSC的數(shù)量增加,抑制效果更明顯。培養(yǎng)72h后,CCK-8法結(jié)果表明,單純ConA刺激后淋巴細胞數(shù)顯著高于共培養(yǎng)細胞。選擇抑制效果最佳的組別1×106個淋巴細胞與1×105個hAMSC共培養(yǎng),ELISA測定1×105個hAMSC對淋巴細胞抑制72h后,上清液中IFN-γ分泌,共培養(yǎng)細胞上清液中IFN-γ水平顯著低于單純ConA刺激細胞。結(jié)論hAMSC能在體外抑制ConA引起的淋巴細胞增殖并減少IFN-γ分泌。
【作者單位】: 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學獸醫(yī)學院動物組織胚胎學與發(fā)育生物學實驗室;內(nèi)蒙古婦幼保健醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】: 人羊膜間充質(zhì)干細胞 淋巴細胞 干擾素-γ 免疫抑制
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863)(2008AA101005)
【分類號】:R392
【正文快照】: 間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSC)能夠趨向于受損傷部位并進行修復,其強大的治療功能日益凸顯出來[1-2]。MSC能夠預防移植物宿主病,且在異體治療中取得良好的效果[3-4],人羊膜間充質(zhì)干細胞(human amniotic mesenchymal stem cells,h AMSC)是In't Anker等[5]從人羊膜
【共引文獻】
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