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80株中國(guó)大陸新生隱球菌環(huán)境株表型和分子特征的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-27 19:22

  本文關(guān)鍵詞:80株中國(guó)大陸新生隱球菌環(huán)境株表型和分子特征的初步研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:研究背景:新生隱球菌所致的感染好發(fā)于細(xì)胞免疫功能低下患者,隨著器官移植、骨髓移植等新技術(shù)的發(fā)展以及AIDS患者的增多,,隱球菌感染的發(fā)生率也呈逐年明顯上升的趨勢(shì)。研究發(fā)現(xiàn)新生隱球菌是隱球菌屬的重要致病菌,屬環(huán)境腐生菌,可從土壤和鴿糞中分離到,并被認(rèn)為是人和動(dòng)物最主要的傳染源,主要引起人的腦膜炎和肺炎。隱球菌病,存在顯著的死亡率,但只有稀缺的流行病學(xué)數(shù)據(jù)存在。國(guó)內(nèi)的研究大都集中于臨床株,本研究擬對(duì)中國(guó)大陸新生隱球菌的環(huán)境株的基因型和分子特征進(jìn)行初步分析,以期進(jìn)一步了解環(huán)境株與臨床株之間內(nèi)在的關(guān)系。我們?cè)噲D進(jìn)行從中國(guó)大陸不同地區(qū)鴿子糞中對(duì)隱球菌環(huán)境分離,從隱球菌病的病原特征、毒力、基因型等生物學(xué)特性進(jìn)行了概述,并對(duì)人新生隱球菌病的傳染和流行的基本環(huán)節(jié)、發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)、防治等方面的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。力求建立監(jiān)測(cè)計(jì)劃,以防止感染。 研究目的:本研究旨在了解中國(guó)大陸地區(qū)新生隱球菌環(huán)境株的分布情況及其表型和基因型特征。 研究方法: 1.實(shí)驗(yàn)對(duì)象:我們采用CACA培養(yǎng)基培養(yǎng)了1372份來自中國(guó)大陸東、西、南、北、中大部分地區(qū)私人和公共養(yǎng)鴿場(chǎng)所的鴿糞標(biāo)本,共分離得到80株新生隱球菌。另有新生隱球菌臨床株及標(biāo)準(zhǔn)株作為對(duì)照。 2.實(shí)驗(yàn)方法: 2.1鴿糞中分離新生隱球菌:獲得新生隱球菌環(huán)境株。 2.2新生隱球菌毒性因子:我們意在了解在新生隱球菌毒力表型特征。 2.2.1莢膜:印度墨汁染色。 2.2.2黑色素:隱球菌在含酚混合物的營(yíng)養(yǎng)基生長(zhǎng)并合成黑色素。 2.2.3尿素酶試驗(yàn) 2.2.437℃生長(zhǎng)試驗(yàn):影響致病真菌生長(zhǎng)的一個(gè)最重要的因素是溫度。在體外條件下,隱球菌屬中的其他中很少能在37℃下生長(zhǎng)。 2.3.分子生物學(xué)研究:M13-PCR結(jié)合ITS序列分析 2.4.動(dòng)物毒力試驗(yàn) 結(jié)果: 新生隱球菌環(huán)境株分離陽性率約5.5%,所有菌株37℃生長(zhǎng)良好,有完整的莢膜,尿素酶試驗(yàn)陽性,ITS序列分析證實(shí)它們都屬于血清型A。M13-PCR顯示,它們的基因型為我國(guó)及東南亞地區(qū)特征性的VNIc型,顯示了與臨床株的高度一致性。 結(jié)論:中國(guó)大陸地區(qū)的隱球菌臨床株與環(huán)境株顯示了高度的同源性,提示對(duì)于易感人群,阻斷與相應(yīng)環(huán)境的接觸可有效防止新生隱球菌的感染。 調(diào)查結(jié)果顯示來源于集鴿鴿糞的分離率高于公共廣場(chǎng)?赡艿脑蚴牵酶鞯丶潟r(shí)間采集的鴿糞基本來自每戶私人鴿友,其通風(fēng)不良,鴿棚中地面和籠子中堆積的鴿糞也更厚,這些條件可能為新生隱球菌在鴿糞中生長(zhǎng)繁殖提供了更為適宜的條件。另外,分離率還與地域相關(guān),按照北緯20~0N~50~0N劃分的3個(gè)區(qū)域,鴿群的標(biāo)本分離率以20~0N~30~0N最高(G3,15.25%),其次為40~0N~5~00N (G1,5.45%),30~0N~40~0N (G2,5.1%)最低?赡艹伺c飼養(yǎng)條件、鴿子的活動(dòng)習(xí)性、運(yùn)動(dòng)遷徙等有關(guān)外,還與氣候條件緊密相關(guān)。提示相應(yīng)的自然環(huán)境(溫帶)更適合該真菌的生存。這些原因與致病力及環(huán)境pH值的關(guān)系值得進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】:新生隱球菌 表型 基因型 環(huán)境分離 鴿糞
【學(xué)位授予單位】:第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R378.1
【目錄】:
  • 摘要6-8
  • ABSTRACT8-10
  • 縮略詞表10-11
  • 前言11-12
  • 課題設(shè)計(jì)12-13
  • 第一部分 鴿糞中分離新生隱球菌13-17
  • (一)材料與儀器13-14
  • (二)方法14-16
  • (三)分析與討論16
  • 參考文獻(xiàn)16-17
  • 第二部分 新生隱球菌表型特征研究17-23
  • (一)材料與儀器17-18
  • (二)方法18-21
  • (三)分析與討論21-22
  • 參考文獻(xiàn)22-23
  • 第三部分 分子特征分析23-34
  • (一)材料與儀器23-25
  • (二)方法25-32
  • (三)分析與討論32-33
  • 參考文獻(xiàn)33-34
  • 第四部分 動(dòng)物毒力試驗(yàn)34-37
  • (一)材料與儀器34-35
  • (二)方法35
  • (三)分析與討論35-36
  • 參考文獻(xiàn)36-37
  • 綜述37-42
  • 參考文獻(xiàn)39-42
  • 附錄42-43
  • 在讀期間發(fā)表論文43
  • 參加科研工作情況說明43-44
  • 致謝44

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李安生,呂桂霞,沈永年,陳偉,吳紹熙;對(duì)兩種新生隱球菌選擇性培養(yǎng)基的比較研究[J];微生物學(xué)通報(bào);2001年05期


  本文關(guān)鍵詞:80株中國(guó)大陸新生隱球菌環(huán)境株表型和分子特征的初步研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):400972

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