目的： 1.構(gòu)建帶有雌激素受體編碼區(qū)的KLF4真核表達載體,并篩選出對小鼠巨噬細胞系RAW264.7形成穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞株,觀察經(jīng)Tamoxifen誘導的重組載體是否可入胞核內(nèi)表達。 2.觀察KLF4基因?qū)π∈缶奘杉毎礡aw264.7細胞向破骨分化及其功能的影響,并對其機制進行初步探討。 3.探討使用CD11b-Cre小鼠和KLF4loxp小鼠雜交后得到在破骨前體細胞及破骨細胞中特異性敲除KLF4轉(zhuǎn)基因小鼠模型的可行性,了解KLF4敲除后的破骨前體細胞對破骨分化及其功能的影響。 方法： 1.擴增KLF4全長片段,將改良型小鼠雌激素受體(oestrogen receptor, ER)的激素鏈接區(qū)(hormone binding domain, HBD)(MOR G525R)序列與之融合后插入pCGF5-IEGZ載體中,轉(zhuǎn)染并篩選穩(wěn)定表達的RAW264.7細胞株,流式細胞儀檢測篩選的轉(zhuǎn)染效率,Q-PCR及Western blot檢測KLF4的表達；DAPI核染色觀察經(jīng)Tamoxifen誘導后重組載體轉(zhuǎn)運胞核中的表達情況。 2. Realtime-PCR及Western blot檢測正常RA...

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【學位級別】：博士

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目錄
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第二部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第三部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄一
附錄二
致謝



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