本文關(guān)鍵詞：抗幽門(mén)螺桿菌人胃源乳桿菌的篩選及其作用評(píng)價(jià)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 從正常人胃粘膜中分離乳桿菌，篩選其中能耐胃腸液的酸性和膽鹽，并具有抗幽門(mén)螺桿菌作用的菌株，通過(guò)小鼠雙悉生模型，評(píng)價(jià)該菌株在胃內(nèi)抗幽門(mén)螺桿菌感染的作用，為進(jìn)一步研制防治幽門(mén)螺桿菌感染的益生菌提供實(shí)驗(yàn)材料。 方法 采集胃鏡檢查者的胃粘膜標(biāo)本，接種于MRS選擇性平板，37℃微需氧培養(yǎng)，挑取可疑菌落涂片鏡檢，對(duì)其中的革蘭陽(yáng)性桿菌進(jìn)行分純培養(yǎng)，通過(guò)形態(tài)學(xué)和生化反應(yīng)初步鑒定。對(duì)疑為乳桿菌的細(xì)菌再PCR擴(kuò)增特異性16SrDNA，并測(cè)序鑒定。 對(duì)分離的乳桿菌，評(píng)價(jià)其在模擬胃腸液pH2.5～pH4.5酸性條件和0.05%～0.2%膽鹽條件下的耐受性，通過(guò)瓊脂擴(kuò)散牛津杯法及細(xì)胞粘附試驗(yàn)評(píng)價(jià)其抑制幽門(mén)螺桿菌生長(zhǎng)和粘附人胃上皮細(xì)胞的能力，同時(shí)半定量檢測(cè)生物膜形成能力和產(chǎn)酸量的多少。 用幽門(mén)螺桿菌和篩選出的乳桿菌給無(wú)菌昆明小鼠灌胃，分別建立幽門(mén)螺桿菌和乳桿菌單悉生和雙悉生感染模型。并于末次灌胃后對(duì)胃內(nèi)定植的細(xì)菌進(jìn)行定量培養(yǎng)和定量PCR檢測(cè)。同時(shí)檢測(cè)胃粘膜組織內(nèi)髓過(guò)氧化物酶的含量及切片HE染色觀察，評(píng)價(jià)其炎癥程度。 結(jié)果 1.從21例胃鏡檢查者胃粘膜中分離出6株乳桿菌，編號(hào)為L(zhǎng)1、L2、L3、L4-1、L4-2、L4-3。經(jīng)測(cè)序、NCBI序列比對(duì)確定L1、L2為口腔乳桿菌，L3為卷曲乳桿菌，L4-1為唾液乳桿菌，L4-2為加氏乳桿菌，L4-3為德氏保加利亞乳桿菌。 2.6株乳桿菌中的L3株，產(chǎn)酸量最大，形成生物膜的能力強(qiáng)于其它菌株，在pH2.5、 pH3.0時(shí)生長(zhǎng)率均達(dá)到了150%，耐高濃度膽鹽，，有較強(qiáng)的抗幽門(mén)螺桿菌活性，阻止幽門(mén)螺桿菌粘附人胃上皮細(xì)胞的作用最強(qiáng)。 3.乳桿菌和幽門(mén)螺桿菌在各實(shí)驗(yàn)組中感染率均為100%，單悉生幽門(mén)螺桿菌感染組胃粘膜有明顯的腺體病變，大量上皮細(xì)胞脫落，髓過(guò)氧化物酶含量高，炎癥程度重。乳桿菌和幽門(mén)螺桿菌雙悉生組中幽門(mén)螺桿菌的定植量明顯降低（P0.05），炎癥變化不明顯，髓過(guò)氧化物酶含量低于單悉生幽門(mén)螺桿菌組（P0.05）。 結(jié)論 成功地從人胃粘膜中分離出6株乳桿菌，并篩選到一株抗幽門(mén)螺桿菌活性較強(qiáng)的菌株L3；成功建立了昆明小鼠的單悉生模型和雙悉生模型；乳桿菌L3能降低胃內(nèi)幽門(mén)螺桿菌的定植和對(duì)胃粘膜的損傷。
【關(guān)鍵詞】：幽門(mén)螺桿菌 乳桿菌 篩選 無(wú)菌小鼠 悉生模型
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R378
【目錄】：

• 符號(hào)說(shuō)明5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 第一部分 人胃粘膜中乳桿菌的分離和鑒定13-23
• 引言13
• 1 材料與方法13-17
• 2 結(jié)果17-22
• 3 討論22-23
• 第二部分 抗幽門(mén)螺桿菌人胃源乳桿菌的篩選23-37
• 引言23
• 1 材料與方法23-29
• 2 結(jié)果29-36
• 3 討論36-37
• 第三部分 悉生小鼠模型評(píng)價(jià)人胃源乳桿菌體內(nèi)抗幽門(mén)螺桿菌的作用37-49
• 引言37
• 1 材料與方法37-42
• 2 結(jié)果42-48
• 3 討論48-49
• 全文總結(jié)49-50
• 參考文獻(xiàn)50-55
• 文獻(xiàn)綜述55-62
• 參考文獻(xiàn)59-62
• 致謝62-63
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及參與研究的課題63-64

【共引文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：抗幽門(mén)螺桿菌人胃源乳桿菌的篩選及其作用評(píng)價(jià)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：398316