本文關鍵詞：剪切應力對種植于不同細胞外基質(zhì)的內(nèi)皮祖細胞的生物學特性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本文旨在探討不同細胞外基質(zhì)對大鼠骨髓來源的晚期內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)生物學特性的影響及種植于不同細胞外基質(zhì)的晚期EPCs對流體剪切應力的反應性。方法:1.密度梯度離心法分離大鼠骨髓單個核細胞,應用M199完全培養(yǎng)基(含15%胎牛血清,10μg/L VEGF及5μg/L b FGF)進行誘導培養(yǎng)。細胞接種前,培養(yǎng)板分別用纖維粘連蛋白(Fibronectin,Fn)、層粘連蛋白(Laminin,Ln)或鼠尾膠原(Collagen,Col)包被,分組為Fn組、Ln組及Col組。以傳至第三代的EPCs,即晚期EPCs為靶細胞,采用CCK-8法、劃痕實驗、粘附能力測定實驗及Matrigel基質(zhì)膠分別檢測其增殖、遷移、粘附及管狀結構形成等功能指標;熒光定量RT-PCR檢測內(nèi)皮分化標志基因v WF和CD31的表達。2.利用平板流室系統(tǒng)對種植于不同細胞外基質(zhì)的晚期EPCs施以12 dyne/cm2剪切應力,免疫熒光染色觀測F-actin的排列情況;CCK-8法檢測細胞增殖;Boyden小室遷移實驗檢測細胞遷移;粘附能力測定實驗檢測細胞粘附;熒光定量RT-PCR及流式細胞儀檢測細胞分化;Matrigel膠實驗檢測管狀結構形成。結果:1.靜止狀態(tài)下,Fn組和Col組細胞增殖能力強于Ln組(P0.05);Fn組細胞粘附能力強于Col組和Ln組(P0.01);Fn組和Col組細胞遷移能力強于Ln組(P0.01);Fn組管腔樣結構形成能力強于Col組及Ln組(P0.05);三組v WF和CD31基因表達無明顯差異。2.剪切應力處理后,Ln組細胞增殖、遷移及血管能力能力均強于Fn組和Col組(P0.05)。靜止狀態(tài)的EPCs,F-actin主要分布在細胞的周邊和細胞核周,排列沒有明顯的方向性。剪切應力加載后,Fn組細胞骨架按照切應力流動的方向排列,肌絲較之靜止狀態(tài)時雜且亂,而Col組和Ln組在剪切應力處理完后,F-actin肌絲明顯增粗,且應力纖維沿剪切應力方向排列整齊,Ln組F-actin聚集成束,應力纖維較多。結論:EPCs的生物學特性受細胞外基質(zhì)的影響;種植于不同細胞外基質(zhì)的EPCs對剪切應力的反應性不同。
【關鍵詞】：細胞外基質(zhì) 內(nèi)皮祖細胞 纖維粘連蛋白 層粘連蛋白 鼠尾膠原 剪切應力
【學位授予單位】：濰坊醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 符號說明8-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-22
• 結果22-25
• 討論25-30
• 結論30-31
• 附圖表31-40
• 參考文獻40-46
• 文獻綜述46-63
• 參考文獻55-63
• 致謝63-64
• 攻讀學位期間撰寫的論文64
• 附件64

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