目的:純化少突膠質前體細胞,并探討氧糖剝奪不同時間對其活力的影響。方法:取SD乳鼠的腦皮質,采用差速貼壁、振蕩分離純化、限定培養(yǎng)基定向培養(yǎng)法,獲取少突膠質前體細胞。鏡下觀察少突膠質前體細胞分化過程中各階段細胞的形態(tài)變化。采用特異性抗體A2B5、MBP、GFAP、IBA-1標記純化后少突膠質前體細胞、成熟少突膠質細胞、星形膠質細胞和小膠質細胞所占比例,以此分析純化后的細胞純度。體外制備細胞氧糖剝奪（oxygen glucose deprivation,OGD）模型,采用CCK-8法觀察其對少突膠質細胞系增殖活性的影響。結果:（1）利用針對少突膠質前體細胞、成熟少突膠質細胞、星形膠質細胞和小膠質細胞的特異性抗體A2B5、MBP、GFAP和IGB-1進行標記,A2B5、MBP染色陽性細胞分別占96.2%、2.1%,GFAP和IBA-1染色陽性細胞小于3%。（2） MTT檢測顯示,隨著OGD干預時間的延長,細胞活力呈降低的趨勢。結論:（1）聯(lián)合應用差速貼壁、恒溫振蕩分離和條件限定培養(yǎng)基可以獲得高純度的少突膠質前體細胞;（2）干預3 h適宜用于體外少突膠質前體細胞的OGD模型。體外建立的OGD模... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 試劑
        1.1.3 主要儀器設備
    1.2 方法
        1.2.1 新生SD大鼠腦皮質混合膠質細胞培養(yǎng)
        1.2.2 OPCs的純化分離培養(yǎng)
        1.2.3 純化后各細胞的免疫熒光法鑒定
        1.2.4 OGD的建立及OGD的不同干預時間對OPCs活力的影響
        1.2.5 MTT檢測OGD干預后細胞的活力
2 結 果
    2.1 混合膠質細胞形態(tài)和分化情況
    2.2 純化后細胞形態(tài)觀察
    2.3 純化后的免疫熒光染色鑒定、純度分析及形態(tài)分析
    2.4 OGD對少突膠質細胞活力的影響
3 結 論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]撫觸療法對缺氧缺血性腦病患兒心理及神經精神發(fā)育的影響分析[J]. 呂麗艷,林杉,丁藝,姜曼.  現(xiàn)代醫(yī)學. 2018(11)
[2]缺血致新生大鼠腦室周圍白質軟化和遠期神經行為變化[J]. 胡燕,蔣犁,張敏,喬立興.  東南大學學報(醫(yī)學版). 2009(02)
[3]硒和B-27添加劑在神經干細胞存活與分化中的作用[J]. 田東萍,蘇敏,吳賢英,張舸.  中華預防醫(yī)學雜志. 2005(05)



本文編號：3723026