目的:摸索抑制神經(jīng)干細胞（NSCs）中β-catenin表達的合適條件,為獲得抑制β-catenin表達的NSCs做準備。利用抑制β-catenin表達的NSCs,探索wnt/β-catenin通路在脈沖強磁場促NSCs增殖中的作用。方法:取新生的SD大鼠雙側側腦室下的NSCs,然后用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)14d。利用RNAi原理構建β-catenin shRNA慢病毒載體及陰性慢病毒載體,并轉(zhuǎn)染NSCs,確定合適的感染復數(shù)（MOI）值。將NSCs分為陰性組（陰性病毒轉(zhuǎn)染組）和實驗組（β-catenin shRNA病毒轉(zhuǎn)染組）,并用4T、0.1Hz、8次的脈沖強磁場干預。在用脈沖強磁場干預后的1d、7d,采用CCK8法檢測陰性組和實驗組的NSCs增殖情況。結果:β-catenin shRNA序列在MOI=10時,對NSCs中β-catenin的抑制效果最好。陰性病毒組在脈沖強磁場干預后1d、7d時NSCs增殖最明顯（P＜0.05）,而實驗組在干預前后NSCs增殖水平無明顯變化。結論:wnt/β-catenin通路在脈沖強磁場促NSCs增殖中起作用。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
    1.3 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 NSCs形態(tài)觀察及免疫組化染色
    2.2 慢病毒轉(zhuǎn)染NSCs并觀察不同MOI值時RNAi慢病毒對NSCs中β-catenin mRNA的水平的影響
        2.2.1 Real Time PCR檢測結果
        2.2.2 Western Blot檢測結果
    2.3 CCK8檢測脈沖強磁場干預后的NSCs增殖情況
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]The Effects of High-intensity Pulsed Electromagnetic Field on Proliferation and Differentiation of Neural Stem Cells of Neonatal Rats in vitro[J]. 蒙德鵬,許濤,郭風勁,印衛(wèi)鋒,彭濤.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2009(06)



本文編號：3710543