目的：分析Ⅲ型組蛋白去乙�；窼IRT1對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2成脂分化的影響，探討SIRT1參與間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化過程的分子作用機(jī)制。 方法：1.建立成脂分化的體外模型，繪制C3H10T1/2細(xì)胞生長曲線，選擇對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行成脂分化誘導(dǎo)；RT-qPCR檢測(cè)SIRT1的激動(dòng)劑resveratrol和抑制劑EX-527對(duì)C3H10T1/2細(xì)胞中SIRT1表達(dá)的影響；并利用流式細(xì)胞術(shù)和MTT檢測(cè)resveratrol和EX-527對(duì)C3H10T1/2細(xì)胞增殖活性和細(xì)胞周期的影響。2. Western blot檢測(cè)C3H10T1/2細(xì)胞成脂分化過程中PPAR-γ水平的變化；RT-qPCR檢測(cè)經(jīng)由resveratrol和EX-527聯(lián)合ADM處理C3H10T1/2后細(xì)胞中成脂分化關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的變化，分析SIRT1可能參與這一變化的作用機(jī)制。油紅O染色及半定量檢測(cè)成脂分化效果。 結(jié)果：1.成功建立了間充質(zhì)干細(xì)的體外成脂分化模型；resveratrol處理后，C3H10T1/2細(xì)胞中SIRT1mRNA水平上表達(dá)上升，而由EX-527處理后C3H10T1/2細(xì)胞中SIR... 

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞
1 前言
    1.1 sirtuin 蛋白概述
    1.2 間充質(zhì)干細(xì)胞概述
    1.3 sirt1 與細(xì)胞分化
    1.4 肥胖與成脂分化
    1.5 研究目的和意義
    1.6 研究技術(shù)路線
    1.7 論文創(chuàng)新點(diǎn)
2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
    2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    2.2 主要試劑
    2.3 本實(shí)驗(yàn)中所用的主要試劑配制方法
    2.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 細(xì)胞的培養(yǎng)
    3.2 繪制細(xì)胞生長曲線
    3.3 MTT 檢測(cè) resveratrol 和 EX-527 對(duì)細(xì)胞增殖的影響
    3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) resveratrol 和 EX-527 對(duì)細(xì)胞周期的影響
    3.5 驗(yàn)證間充質(zhì)干細(xì)胞 C3H10T1/2 的多向分化潛能
    3.6 Western blotting 技術(shù)檢測(cè) resveratrol 和 EX-527 對(duì)成脂分化過程中細(xì)胞的PPAR-γ表達(dá)水平的影響
    3.7 油紅 O 染色檢測(cè) resveratrol 和 EX-527 對(duì) C3H10T1/2 細(xì)胞成脂分化的影響
    3.8 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè) resveratrol 和 EX-527 對(duì) C3H10T1/2 細(xì)胞成脂分化的影響
    3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
4 結(jié)果
    4.1 S 型的細(xì)胞生長曲線
    4.2 MTT 檢測(cè)細(xì)胞增殖活性
    4.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) C3H10T1/2 的細(xì)胞周期分布
    4.4 C3H10T1/2 具有多向分化潛能
    4.5 Western Blot 檢測(cè)不同濃度的 resveratrol 和 EX-527 對(duì) C3H10T1/2 細(xì)胞成脂分化關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子 PPAR-γ的影響
    4.6 油紅 O 染色檢測(cè)兩種藥物對(duì)細(xì)胞成脂分化的影響
    4.7 RT-qPCR 檢測(cè)成脂分化標(biāo)志因子及關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)
5 討論
    5.1 resveratrol 抑制 C3H10T1/2 細(xì)胞增殖并抑制其向成脂細(xì)胞分化
    5.2 HDAC 與成脂分化
    5.3 sirt1 通過影響 PPAR-γ在細(xì)胞中的表達(dá)水平來調(diào)節(jié)成脂分化
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
在校發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：3706030