本文關(guān)鍵詞：人類髓核細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：關(guān)于人類髓核細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法不一，如何提高人類髓核細(xì)胞獲得效率的問題尚未解決。 目的：優(yōu)選人類髓核細(xì)胞制備的消化酶組分。 方法：無菌條件下取急性外傷后人類椎間盤髓核組織，按不同混合酶組分劃分為2組，Ⅰ組成分為0.2%Ⅱ型膠原酶；Ⅱ組成分為先用0.25%胰酶消化30min，再用0.2%Ⅱ型膠原酶。每組再按消化時(shí)間分為2h，，4h，過夜3個(gè)亞組。最后重懸細(xì)胞終體積均定位2mL并計(jì)數(shù)，采用含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液體外培養(yǎng)細(xì)胞。 結(jié)果與結(jié)論：采用2種不同酶組分進(jìn)行消化，發(fā)現(xiàn)消化時(shí)間2h及4h時(shí)Ⅱ組消化細(xì)胞更多，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在孵育過夜組中，Ⅰ和Ⅱ組的細(xì)胞活性細(xì)胞率明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05)。在作用4h時(shí)，組織塊消失，計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量最多，提示0.2%Ⅱ型膠原酶、消化人類髓核組織4h為獲取人類髓核細(xì)胞的最佳條件。
【關(guān)鍵詞】：人類 髓核細(xì)胞 Ⅱ型膠原酶 胰酶 消化 MTT
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329
【目錄】：

• 摘要4-5
• 英文縮略詞表5-7
• 0 引言7-9
• 1 對象和方法9-13
• 設(shè)計(jì)9
• 時(shí)間及地點(diǎn)9
• 材料9
• 納入標(biāo)準(zhǔn)9-10
• 主要試劑及儀器10
• 方法10-11
• 酶處理及分組11-12
• 細(xì)胞計(jì)數(shù)12
• 細(xì)胞培養(yǎng)及傳代12
• 細(xì)胞增殖能力檢測12-13
• 主要觀察指標(biāo)13
• 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析13
• 2 結(jié)果13-16
• 2.1 不同組分酶分離細(xì)胞的數(shù)量13-14
• 2.2 不同組分酶對細(xì)胞存活率的影響14-15
• 2.3 不同組分酶液對細(xì)胞增殖能力的影響15-16
• 3 討論16-18
• 參考文獻(xiàn)18-21
• 綜述21-28
• 參考文獻(xiàn)24-28
• 致謝28

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 賽佳明;胡有谷;王德春;;椎間盤髓核細(xì)胞組織塊法原代培養(yǎng)[J];脊柱外科雜志;2006年05期

2 張榮峰;阮狄克;張超;孫海燕;易紅蕾;王愛蘭;;不同代次成人正常髓核細(xì)胞的形態(tài)及生長動(dòng)力學(xué)比較[J];脊柱外科雜志;2008年03期

3 葉冬平;梁偉國;戴麗冰;沈雁;;人正常椎間盤髓核細(xì)胞體外不同培養(yǎng)代次的生物學(xué)性狀分析:適應(yīng)于組織工程椎間盤種子細(xì)胞的選擇[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年24期

4 王鋒;吳小濤;王運(yùn)濤;邵建樹;張明;;單純Ⅱ型膠原酶消化法分離、培養(yǎng)人退變椎間盤髓核細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察[J];中國脊柱脊髓雜志;2010年04期

5 李鋒生;梁偉國;葉冬平;戴麗冰;陳鴻輝;;體外培養(yǎng)人退變髓核細(xì)胞的生物學(xué)性狀[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年28期

  本文關(guān)鍵詞：人類髓核細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：369001