間充質(zhì)干細胞在治療骨相關(guān)疾病中具有重要意義,但其在成骨分化中的機制尚未完全闡明。該研究通過分析GEO數(shù)據(jù)庫中有關(guān)組蛋白去乙�；敢种苿℉DACi）處理過的小鼠成骨前體細胞（MC3T3-E1 preosteoblasts）的生物芯片數(shù)據(jù),篩選出22個在成骨分化中上調(diào),在成脂分化中下調(diào),且受HDACi緊密調(diào)控的基因。這22個基因中有6個基因（Cacnb3、Lpcat2、Cd248等）與Ca²⁺調(diào)節(jié)功能相關(guān),提示Ca²⁺可能在MSCs分化中發(fā)揮重要作用。在后續(xù)實驗中,我們觀察到電壓依賴性鈣通道亞單位β3（calcium voltage-gated channel auxiliary subunit beta 3, Cacnb3）和磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶2（lysophosphatidylcholine acyltransferase 2, Lpcat2）在小鼠脂肪間充質(zhì)干細胞（ADSCs）、人骨髓間充質(zhì)干細胞（hBMSCs）和小鼠成骨前體細胞（MC3T3-E1）的成骨分化過程中上調(diào),提示Cacnb3、Lpcat2可能參與ADSCs的體外成骨分化。此外,利... 

【文章來源】：中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2019,41(08)CSCD

【文章頁數(shù)】：11 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞和芯片數(shù)據(jù)
    1.2 試劑和儀器
    1.3 數(shù)據(jù)處理及差異基因分析
    1.4 小鼠ADSCs的原代培養(yǎng)
    1.5 流式細胞術(shù)檢測ADSCs表面標志物
    1.6 體外成骨分化
    1.7 ALP染色和茜素紅染色
    1.8 實時熒光定量核酸擴增檢測系統(tǒng)(Real-timequantitative PCR detecting system)
    1.9 MC3T3-E1細胞的轉(zhuǎn)染
    1.1 0 細胞內(nèi)鈣離子水平檢測
    1.1 1 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 利用生物信息技術(shù)篩選成骨相關(guān)基因
    2.2 小鼠脂肪間充質(zhì)干細胞鑒定分析
    2.3 Cacnb3基因在細胞成骨誘導(dǎo)過程中表達升高
    2.4 敲低Cacnb3抑制MC3T3-E1細胞成骨分化
    2.5 成骨不全小鼠中Cacnb3表達降低
3 討論



本文編號：3626848