人臍靜脈內皮細胞永生化及生物學特性的研究
發(fā)布時間:2022-01-01 06:15
目的 建立永生化人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)系并探討永生化對HUVECs增殖、凋亡及成瘤性影響。方法 擴增并提取猿猴病毒40大T抗原(SV40LT)和人端粒酶反轉錄酶催化亞基(hTERT)基因,反轉錄病毒載體介導感染HUVECs;篩選2周;聚合酶鏈反應(PCR)擴增后行瓊脂糖凝膠電泳成像鑒定目的基因是否轉入HUVECs;細胞計數(shù)法比較細胞增殖、流式細胞術檢測細胞凋亡、裸鼠成瘤實驗檢測細胞惡性轉化。結果 篩選出抗嘌呤霉素陽性克隆,SV40LT、hTERT成功轉入HUVECs;永生化組細胞生長曲線上移,細胞增殖第5、6、7天,SV40LT永生化組及hTERT永生化組與HUVECs組細胞數(shù)目差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),hTERT永生化組和HUVECs組細胞數(shù)目差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);HUVECs組細胞總凋亡率為(11.2±0.9)%,SV40LT永生化組HUVECs總凋亡率為(3.4±0.4)%,hTERT永生化組HUVECs總凋亡率為(2.8±0.4)%,SV40LT永生化組、hTERT永生化組凋亡率均低于HUVECs組(均P<0.05);兩種永生化細...
【文章來源】:中華實驗外科雜志. 2019,36(01)
【文章頁數(shù)】:3 頁
本文編號:3561784
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