神經干細胞（neural stem cell，NSC）是中樞神經系統(tǒng)內存在的具有自我更新能力和多種分化潛能的一種未分化細胞。目前的研究表明，神經干細胞可以在體外大量增殖，并可誘導分化為中樞神經系統(tǒng)內的三種主要細胞—神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞，但其增殖、分化機制仍不清楚；脊髓損傷修復一直是神經科學關注的焦點之一，其治療的主要策略，一方面是給予足量外源性神經營養(yǎng)因子，改善神經再生環(huán)境，促進神經再生；另一方面是組織移植治療，以往常用的移植材料多為胚胎腦組織、外周神經組織以及某些非神經組織等，雖然取得了一些進展，但仍有許多問題。 因此，本研究利用細胞培養(yǎng)技術、DNA芯片技術、基因轉染技術、流式細胞計數(shù)、HRP逆行示蹤、原位雜交和免疫組化等方法，分離培養(yǎng)了人和大鼠的神經干細胞，并制備了BDNF基因修飾的大鼠神經干細胞；觀察了多種因素條件下，神經干細胞的分化過程及其基因變化；探討了神經干細胞和BDNF基因修飾神經干細胞作為移植材料用于脊髓損傷修復的作用。結果如下： 一、通過無血清培養(yǎng)技術，分離培養(yǎng)了人和大鼠胚胎腦皮層細胞，經過Nestin鑒定和5％胎牛血清誘導分化后，行GFAP... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數(shù)】：161 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

大鼠NSC集落，相差顯微鏡Nxzoo

大[}NSC分化16天后，NF-200免疫反應陽性細臉SABC毓酸鎳肢增強法XdM

大鼠NSC分化14天后

【參考文獻】：
期刊論文
[1]人胚胎大腦皮層神經干細胞的分離培養(yǎng)[J]. 李巍,蔡文琴,吳康,秦茂林.  解剖學報. 2002(03)
[2]IL-1β和胎牛血清對大鼠神經干細胞分化的影響[J]. 劉仕勇,張可成,楊輝,呂勝青.  中國組織化學與細胞化學雜志. 2000(04)
[3]基因修飾細胞移植治療大鼠脊髓損傷的電生理評價[J]. 余科煒,葉曉健,馮紅,曲伸,李家順,路長林.  第二軍醫(yī)大學學報. 2000(07)
[4]微波輻射對小白鼠脂質過氧化作用及神經遞質含量的影響[J]. 曹兆進,張洪橋,陶勇,劉景蘭,李雙黎,徐培基,陳健.  衛(wèi)生研究. 2000(01)
[5]成年大鼠紋狀體區(qū)神經干細胞的分離培養(yǎng)[J]. 劉仕勇,張可成,楊輝,蔡文琴,何家全.  解剖學報. 2000(01)
[6]微波輻射對海馬CA-1區(qū)神經元的損害及其防治[J]. 張劍寧,章翔,易聲禹,李安民.  中華神經外科雜志. 1999(01)
[7]微波輻照對小鼠離體淋巴細胞Ca2+、細胞內環(huán)磷酸腺苷及DNA合成的影響[J]. 王勇,寧竹之,王登高.  中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志. 1998(02)
[8]胎鼠脊髓內源性NT-3及BDNF對脊髓神經元的營養(yǎng)作用[J]. 梁喆,農藝,楊浩,朱俊玲,鮑璿,鞠躬.  第四軍醫(yī)大學學報. 1997(06)
[9]不同胎齡脊髓移植物對成年大鼠完全橫斷脊髓修復的影響[J]. 趙剛,蔡錦方,張亞彬,王平山.  中華器官移植雜志. 1997(03)
[10]腦源性神經營養(yǎng)因子mRNA在胚胎脊髓修復成鼠脊髓損傷過程中的變化[J]. 李兵倉,王正國,朱佩芳,胡建,李應玉,廖維宏.  中華醫(yī)學雜志. 1997(07)



本文編號：3549009