本文關鍵詞：凍融—凍干法制備流感疫苗脂質體及其細胞免疫研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：我們曾對薄膜分散法制備流感疫苗脂質體凍干粉作了系統的研究,并考察了其體液免疫、粘膜免疫和細胞免疫的效果,免疫原性均有明顯提高。但薄膜分散法由于制備過程中有溫度升高過程,不適用于活疫苗的制備。 本課題在薄膜分散-凍干法的基礎上,進行了凍融-凍干法制備工藝的研究,以適應減毒活疫苗的制備要求。考察了脂質體混懸液制備過程中主要影響因素,以包封率為主要指標,以正交實驗篩選出最佳處方。對脂質體混懸液和凍干粉的粒子形態(tài),粒徑分布進行了分析。以顯微觀察外觀和包封率為指標考察了脂質體混懸液和凍干粉的穩(wěn)定性,并通過肺部灌注給藥方式免疫清潔級ICR小鼠,通過MTT法檢測脾淋巴細胞的增殖,通過流式細胞儀檢測CD4+與CD8+細胞及CD4/CD8的比值。并將凍融-凍干法與薄膜分散法制備的脂質體疫苗的細胞免疫效果進行對比。 根據最優(yōu)處方制備的流感疫苗脂質體包封率為84.14%,成圓形或橢圓形,粒度分布均勻,平均粒徑1.91μm。考察了在不同的溫度(4℃、25±2℃、40±2℃)條件下的物理穩(wěn)定性。4℃儲存條件下,制備的凍干脂質體180天的包封率無顯著變化,25℃制備的凍干脂質體120天的包封率無顯著變化,穩(wěn)定性良好。而且凍融凍干法全程制備條件溫和,能適應流感裂解疫苗脂質體制備的特殊要求。細胞免疫實驗表明凍融-凍干法制備的流感疫苗脂質體與薄膜分散法制備的免疫效果無顯著性差異,均明顯高于疫苗原液腹腔注射給藥,表明凍融-凍干法是一種可行的制備流感疫苗脂質體的工藝,為未來該工藝應用于減毒活疫苗奠定了基礎。
【關鍵詞】：凍融-凍干法 包封率 穩(wěn)定性 細胞免疫
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文摘要6-7
• Abstract7-9
• 第一章 前言9-17
• 1 脂質體佐劑9-11
• 2 脂質體疫苗肺部給藥11-17
• 2.1 肺部藥物吸收的特點11-12
• 2.2 脂質體肺部給藥方式及穩(wěn)定性12-15
• 2.3 脂質體肺部給藥的安全性15-17
• 第二章 凍融凍干法制備流感疫苗脂質體工藝及穩(wěn)定性研究17-32
• 1 材料17-18
• 1.1 流感疫苗17
• 1.2 實驗試劑17
• 1.3 實驗儀器17-18
• 2 方法18-25
• 2.1 凍融-凍干法制備流感疫苗脂質體工藝影響因素實驗18-20
• 2.2 凍融-凍干法正交試驗處方篩選20-21
• 2.3 凍融-凍干法制備流感疫苗脂質體凍干粉21-23
• 2.4 流感疫苗脂質體形態(tài)觀察和粒度分布測定23
• 2.5 流感疫苗脂質體包封率測定23-25
• 2.6 流感疫苗脂質體物理穩(wěn)定性考察25
• 3 結果25-29
• 3.1 凍融-凍干法最優(yōu)處方25
• 3.2 流感疫苗脂質體形態(tài)觀察和粒度分布測定25-27
• 3.3 凍融-凍干法制備疫苗脂質體凍干粉包封率測定結果27-28
• 3.4 凍融-凍干法制備流感疫苗脂質體物理穩(wěn)定性考察28-29
• 4 討論和小結29-32
• 4.1 凍融-凍干法制備脂質體特點29-30
• 4.2 凍融-凍干法中包封藥物步驟的選擇30
• 4.3 兩種方法法制備脂質體形態(tài)、粒徑、穩(wěn)定性比較30
• 4.4 疫苗脂質體凍干粉可減輕傳統疫苗冷鏈運輸壓力30-32
• 第三章 細胞免疫-薄膜分散法和凍融凍干法制備流感疫苗脂質體干粉肺部給藥的對比32-47
• 1 材料32-34
• 1.1 流感疫苗32
• 1.2 實驗試劑32-33
• 1.3 實驗動物33
• 1.4 實驗儀器33-34
• 2 方法34-37
• 2.1 流感疫苗脂質體制備34-35
• 2.2 脾淋巴細胞增殖實驗(MTT)35-37
• 2.3 T淋巴細胞表面標記檢測實驗37
• 3 結果37-46
• 3.1 脾淋巴細胞增殖實驗結果37-38
• 3.2 T淋巴細胞表面標記檢測實驗結果38-46
• 4. 討論46-47
• 參考文獻47-51
• 綜述 脂質體應用及研究進展51-65
• 1 脂質體制備方法51-54
• 1.1 機械分散法51-52
• 1.2 有機溶劑分散法52-53
• 1.3 逆相蒸發(fā)法53
• 1.4 鈣融合法53
• 1.5 微乳冷卻法53
• 1.6 凍融法53-54
• 2 脂質體給藥特點54-55
• 2.1 淋巴系統定向性54
• 2.2 脂質體藥物釋放具有選擇性54
• 2.3 使抗癌藥物在靶區(qū)具有滯留性54
• 2.4 脂質體制劑在體內的生物運轉54-55
• 2.5 延緩釋藥55
• 2.6 控制藥物在組織內的分布與在血液內的清除率55
• 2.7 對瘤細胞的親和性55
• 3 脂質體作為藥物載體的應用55-57
• 3.1 在靶向藥物中的應用55-56
• 3.2 在緩釋藥物系統中的應用56
• 3.3 口服藥物中的應用56-57
• 3.4 在藥物轉導中的應用57
• 3.5 脂質體霧化肺部吸入劑57
• 4 作為藥物佐劑57-61
• 4.1 脂質體用作疫苗佐劑的作用機理57-58
• 4.2 脂質體用作疫苗佐劑的優(yōu)點58-59
• 4.3 脂質體作為疫苗佐劑的應用59-61
• 5 存在問題61-62
• 參考文獻62-65
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況65-66
• 致謝66

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

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10 羅云敬,劉海濤,李天劍,沈含熙;頭孢菌素類抗生素脂質體的包封率測定與滲漏研究[J];中國生化藥物雜志;1999年01期

  本文關鍵詞：凍融—凍干法制備流感疫苗脂質體及其細胞免疫研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：354007