本文關(guān)鍵詞：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)硫化氫對脂多糖致肝細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)在硫化氫(H2S)調(diào)節(jié)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡中的作用；初步研究外源性H2S調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)肝細(xì)胞ERS的分子機(jī)制。 方法：大鼠肝細(xì)胞系BRL細(xì)胞培養(yǎng)，用LPS、ERS誘導(dǎo)劑毒胡蘿卜素(TG)、ERS抑制劑4-苯基丁酸(4-PBA)分別或組合處理BRL細(xì)胞；用小干擾RNA(siRNA)技術(shù)沉默H2S生成酶胱硫醚-β-合酶(CBS)及胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)表達(dá)，H2S供體硫氫化鈉(NaHS)與LPS共同處理肝細(xì)胞；分別用抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(NAC)、KATP通道抑制劑格列苯脲(Gli)預(yù)處理細(xì)胞，再觀察NaHS與LPS的作用。用去蛋白法檢測細(xì)胞H2S含量；用MTT比色法或臺盼藍(lán)拒染法檢測細(xì)胞活力；用Hoechst33258熒光染色確證細(xì)胞凋亡；用Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率；用Western blot檢測ERS標(biāo)志蛋白GRP78和ERS凋亡相關(guān)蛋白CHOP、caspase-12和caspase-3蛋白表達(dá)。 結(jié)果：與溶劑對照組比較，LPS可劑量和時間依賴性引起肝細(xì)胞活力顯著降低、細(xì)胞凋亡率明顯增加，誘導(dǎo)GRP78以及CHOP、caspase-12和caspase-3蛋白表達(dá)上調(diào)；TG本身可引起肝細(xì)胞活力降低和細(xì)胞凋亡增加，能顯著加重LPS引起的肝細(xì)胞損傷；4-PBA可起細(xì)胞凋亡少量但明顯增加，明顯抑制了LPS引起的肝細(xì)胞凋亡增加；CBS siRNA、CSE siRNA能顯著抑制靜息肝細(xì)胞和LPS引起肝細(xì)胞內(nèi)源性H2S生成，并抑制LPS引起肝細(xì)胞活力降低、細(xì)胞凋亡增加，翻轉(zhuǎn)了LPS引起GRP78和CHOP、caspase-12和caspase-3蛋白表達(dá)上調(diào)；NAC預(yù)處理能明顯降低LPS引起的細(xì)胞活力降低、凋亡增加以及GRP78和CHOP、caspase-12和caspase-3蛋白表達(dá)上調(diào)，與NaHS共同作用具有協(xié)同效應(yīng)；Gli預(yù)處理能明顯促進(jìn)LPS引起的細(xì)胞活力降低、凋亡增加以及GRP78和CHOP、caspase-12和caspase-3蛋白表達(dá)上調(diào)，部分阻斷NaHS對LPS引起ERS的拮抗作用。 結(jié)論：LPS通過引起氧化應(yīng)激而誘導(dǎo)肝細(xì)胞ERS，ERS參與介導(dǎo)LPS誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡；在本實驗條件下，內(nèi)源性H2S上調(diào)、外源性H2S抑制LPS引起的肝細(xì)胞ERS，從而調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡變化；外源性H2S通過增強(qiáng)抗氧化效應(yīng)、開放KATP通道抑制LPS引起的ERS上調(diào)，，從而減少了LPS誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡增加；內(nèi)、外源性H2S對LPS誘導(dǎo)肝細(xì)胞ERS的調(diào)節(jié)作用迥異，其機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 硫化氫 脂多糖 肝細(xì)胞 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 序言10-16
• 參考文獻(xiàn)13-16
• 第一部分 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與介導(dǎo)脂多糖誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡16-36
• 引言16-17
• 材料與方法17-24
• 結(jié)果24-26
• 討論26-28
• 小結(jié)28
• 參考文獻(xiàn)28-30
• 附圖30-34
• 附表34-36
• 第二部分 硫化氫對脂多糖誘導(dǎo)肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的調(diào)節(jié)作用36-59
• 引言36-37
• 材料與方法37-42
• 結(jié)果42-45
• 討論45-48
• 小結(jié)48
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 附圖51-56
• 附表56-59
• 第三部分 外源性硫化氫調(diào)節(jié)脂多糖誘導(dǎo)肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的分子機(jī)制59-81
• 引言59-60
• 材料與方法60-62
• 結(jié)果62-66
• 討論66-69
• 小結(jié)69
• 參考文獻(xiàn)69-72
• 附圖72-78
• 附表78-81
• 結(jié)論81-82
• 不足之處及今后研究方向82-83
• 綜述83-93
• 參考文獻(xiàn)90-93
• 縮略詞中英文對照表93-94
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文94-95
• 致謝95-96

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 韓業(yè)興;谷振勇;叢斌;岑新海;劉東旭;劉曉;;擠壓家兔后肢導(dǎo)致急性肝損傷和抗氧化能力降低[J];法醫(yī)學(xué)雜志;2006年04期

2 劉俊;郝丹丹;朱依純;;硫化氫對大鼠心臟成纖維細(xì)胞增殖的抑制作用[J];生理學(xué)報;2011年04期

  本文關(guān)鍵詞：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)硫化氫對脂多糖致肝細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：352877