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大鼠腎小管上皮細胞缺氧/復氧模型的建立

發(fā)布時間:2021-10-27 16:03
  目的:建立一種新的大鼠腎小管上皮細胞NRK-52E缺氧/復氧模型,為下一步實驗選擇合適的缺氧/復氧時間點。方法:本實驗使用大鼠NRK-52E細胞。實驗分為對照組及實驗組,實驗組分為缺氧2、4和6 h及缺氧后復氧1、12和24 h組。缺氧時換用缺氧液,再置入N294%+O21%+CO25%缺氧環(huán)境;缺氧后換用含10%胎牛血清的DMEM/F12,置入空氣95%+ CO25%有氧環(huán)境,制作缺氧/復氧模型;臺盼藍攝取法進行細胞計數(shù)及檢測細胞存活率,分光光度法檢測培養(yǎng)基中的乳酸脫氫酶(LDH)含量,用流式細胞術(Annexin-V/PI雙標記)及TUNEL法檢測細胞凋亡。結果:1、臺盤藍活細胞計數(shù)大鼠腎小管上皮細胞經(jīng)過缺氧/復氧處理后,與對照組比較,臺盼藍攝取率顯著提高,細胞存活率顯著下降;實驗組中,復氧后細胞存活率較復氧前明顯降低,在R12到達最低值,隨之逐漸升高,但是在R24時仍較復氧前降低(P<0.05)。2、LDH檢測大鼠腎小管上皮細胞經(jīng)過缺氧/復氧處理后,LDH含量升高。實驗組中,復氧后LDH值較復氧前明顯升高(P<0.05),在R12到達最高值,隨之逐漸降低,但是在R24... 

【文章來源】:山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】:38 頁

【學位級別】:碩士

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【參考文獻】:
期刊論文
[1]人近曲腎小管上皮細胞缺氧/復氧損傷模型的建立[J]. 杜逸亭,董文斌,王明勇,航永倫.  中國危重病急救醫(yī)學. 2005(10)
[2]血管緊張素Ⅱ通過抑制AKT/蛋白激酶B磷酸化誘導腎小管上皮細胞凋亡[J]. 朱吉莉,丁國華,王學玉.  中華腎臟病雜志. 2005(03)
[3]Cyr61基因過表達對人腎小管上皮細胞凋亡的影響[J]. 沈?qū)W飛,梅長林,張巖,趙海丹,劉亞偉,戴兵,王文靖,許濤.  腎臟病與透析腎移植雜志. 2005(01)
[4]急性腎功能衰竭腎小管上皮細胞凋亡機制[J]. 黃燕飛,李瑛.  腎臟病與透析腎移植雜志. 2004(03)
[5]缺氧與復氧對腦動脈內(nèi)皮細胞一氧化氮合酶Ⅲ表達的影響[J]. 宋振舉,楊光田,陸德琴,王迪潯.  中國危重病急救醫(yī)學. 2003(09)
[6]糖尿病大鼠腎臟細胞凋亡的研究[J]. 蘇君梅,董峰,易華,董傳仁,歐陽靜萍,楊海鷺.  武漢大學學報(醫(yī)學版). 2003(01)
[7]多囊腎病囊腫襯里上皮細胞增生與凋亡的研究[J]. 原愛紅,梅長林.  腎臟病與透析腎移植雜志. 2001(01)



本文編號:3461931

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