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條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)人牙髓干細(xì)胞分化為角膜上皮樣細(xì)胞

發(fā)布時間:2021-09-25 16:37
  目的探討條件培養(yǎng)基(CM)誘導(dǎo)人牙髓干細(xì)胞(DPSCs)分化為角膜上皮樣細(xì)胞的可行性。方法體外分離培養(yǎng)DPSCs,通過流式細(xì)胞術(shù)鑒定DPSCs,細(xì)胞計數(shù)試劑盒-8(CCK-8)檢測基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BM)和不同比例CM培養(yǎng)的DPSCs增殖活性,選用30%、60%、90%CM誘導(dǎo)DPSCs,BM培養(yǎng)的DPSCs設(shè)為陰性對照組,免疫熒光檢測角膜上皮細(xì)胞標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白3(CK3)、細(xì)胞角蛋白12(CK12)的表達(dá)。結(jié)果 DPSCs增殖活性的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P> 0. 05);誘導(dǎo)3 d時,30%、60%、90%CM組細(xì)胞不表達(dá)CK3,60%和90%CM組細(xì)胞開始表達(dá)CK12; 7 d時,30%、60%、90%CM組細(xì)胞可見CK3、CK12的表達(dá); 11 d和14 d時,30%、60%、90%CM組細(xì)胞繼續(xù)表達(dá)CK3、CK12。BM組細(xì)胞未見CK3、CK12表達(dá)。結(jié)論在一定誘導(dǎo)條件下,DPSCs可分化為角膜上皮樣細(xì)胞。 

【文章來源】:解剖學(xué)報. 2019,50(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
材料和方法
    1. 標(biāo)本收集
    2. 主要試劑和實(shí)驗細(xì)胞
    3. 方法
        3.1 細(xì)胞的分離和培養(yǎng):
        3.2 流式細(xì)胞術(shù):
        3.3 條件培養(yǎng)基 (conditioned medium, CM) 的制備:
        3.4 CCK-8檢測細(xì)胞增殖活性:
        3.5 細(xì)胞誘導(dǎo):
        3.6 免疫熒光:
    4. 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
    1.細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
    2.流式細(xì)胞術(shù)鑒定DPSCs
    3.CCK-8檢測細(xì)胞增殖活性
    4. 誘導(dǎo)細(xì)胞形態(tài)
    5. 免疫熒光檢測CK3、CK12的表達(dá)
討論



本文編號:3410076

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