本文關(guān)鍵詞：頭風湯對偏頭痛大鼠模型中腦導水管周圍灰質(zhì)c-fos、c-jun基因表達影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景 偏頭痛是一種表現(xiàn)為反復發(fā)作的一側(cè)或雙側(cè)搏動性頭痛的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂性疾病，嚴重者可喪失部分日常生活能力，給患者造成了嚴重的身心及經(jīng)濟負擔，且其發(fā)病率有逐年增多的趨勢。因此，偏頭痛的防治成為當今醫(yī)學研究的重點和一項迫切任務(wù)。但其發(fā)病機制復雜，仍未徹底明確。在前期研究中，以清熱燥濕法為治則，由加味二陳湯加減創(chuàng)制而成的頭風湯治療偏頭痛在臨床研究中取得了滿意效果。中腦導水管周圍灰質(zhì)（PAG)是一個結(jié)構(gòu)與功能相對復雜的區(qū)域,它廣泛參與疼痛調(diào)節(jié)、恐懼和焦慮、自主神經(jīng)反應(yīng)等功能活動的調(diào)控，是重要的痛覺調(diào)整中樞，在痛覺調(diào)制過程中發(fā)揮著承上啟下的作用，大量研究資料提示中腦導水管周圍灰質(zhì)與偏頭痛有著非常密切的關(guān)系,但其作用仍不明確。原癌基因c-fos和c—jun屬于即刻早期基因，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能活動的信號轉(zhuǎn)導和調(diào)控過程中有著重要作用，這兩種物質(zhì)被廣泛用來作為神經(jīng)元激活的標記物,在各種偏頭痛模型中用以研究神經(jīng)元的功能通路，多項研究提示早快基因在偏頭痛的發(fā)生中發(fā)揮重要作用。 目的 建立硝酸甘油誘導的偏頭痛模型，應(yīng)用免疫組化法觀察偏頭痛模型大鼠中腦導水管周圍灰質(zhì)c-fos、c-jun基因表達及頭風湯對其的影響，探討中腦導水管周圍灰質(zhì)在偏頭痛發(fā)生中所起的作用以及c-fos與c-jun表達的相關(guān)性，并從分子生物學上闡明頭風湯治療偏頭痛的作用機理，為清熱燥濕法治療偏頭痛提供實驗依據(jù)，進一步證實頭風湯能夠有效地預防和治療偏頭痛，為中醫(yī)藥防治偏頭痛提供新思路。 方法 將80只SD大鼠隨機分為4組，正常對照組、模型組、頭風湯治療組、頭風湯預防組，每組20只大鼠，其中10只觀察大鼠行為，10只斷頭取腦進行免疫組化染色。正常對照組大鼠不做任何處理，模型組、頭風湯治療組和預防組大鼠用硝酸甘油（GTN）10mg/kg劑量皮下注射建立實驗性偏頭痛模型，觀察大鼠行為學表現(xiàn)，模型組造模30min后灌胃蒸餾水0.24ml/g，治療組造模30min后灌胃頭風湯0.24ml/g，預防組建立模型前按0.24ml/g灌胃頭風湯一周。造模4h后取出腦組織，切片制備標本，用免疫組化SABC法觀察各組大鼠中腦導水管周圍灰質(zhì)c-fos、c-jun表達的陽性細胞數(shù)、面積及灰度，使用統(tǒng)計學方法進行各組間比較。 結(jié)果 給大鼠注射硝酸甘油后成功復制偏頭痛大鼠模型，實驗大鼠出現(xiàn)耳紅、爬籠、撓頭等典型表現(xiàn)。模型組中腦導水管周圍灰質(zhì)c-fos、c-jun基因表達明顯增強，與正常對照組比較有明顯統(tǒng)計學差異，P0.05且兩者表達具有明顯相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)r=0.989，P0.05；治療組及預防組中c-fos、c-jun基因表達明顯減弱，與模型組比較有顯著統(tǒng)計學差異,P0.05，與正常對照組比較無明顯統(tǒng)計學差異，P0.05。 結(jié)論 注射硝酸甘油可以成功誘發(fā)偏頭痛大鼠模型，是復制偏頭痛動物模型常用的一種穩(wěn)定、有效、簡便、經(jīng)濟的方法。中腦導水管周圍灰質(zhì)作為疼痛調(diào)節(jié)中樞在偏頭痛的發(fā)作時發(fā)揮著重要作用。偏頭痛發(fā)作時c-fos、c-jun基因表達明顯升高，是神經(jīng)元激活的標志之一，在疼痛的產(chǎn)生、信號傳遞上具有重要作用。頭風湯可以明顯降低偏頭痛大鼠模型c-fos、c-jun基因的表達，緩解偏頭痛大鼠行為學表現(xiàn)，頭風湯對偏頭痛具有一定的防治作用，清熱燥濕法是治療偏頭痛的重要方法。
【關(guān)鍵詞】：清熱燥濕 頭風湯 偏頭痛 中腦導水管 大鼠 基因表達
【學位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R277.7
【目錄】：

• 提要3-5
• Abstract5-10
• 引言10-13
• 實驗材料13-15
• 一、 實驗動物13
• 二、 實驗藥品和試劑13-14
• 三、 主要儀器14-15
• 實驗方法15-18
• 一、 動物分組、模型制備及給藥15
• 二、 動物行為學觀察15
• 三、 標本制備15-17
• （一） 大鼠灌注固定15-16
• （二） 切片制作16
• （三） 病理切片常規(guī) HE 染色16
• （四） 免疫組織化學染色16-17
• 五、 鏡檢、圖像分析方法17
• 六、 統(tǒng)計學分析17-18
• 結(jié)果18-23
• 一、 大鼠行為學變化18-20
• （一） 大鼠耳紅出現(xiàn)與消失時間18
• （二） 撓頭動作出現(xiàn)及消退時間18-19
• （三） 各時間段撓頭次數(shù)19
• （四） 各時間段大鼠爬籠次數(shù)19-20
• 二、 頭風湯對實驗性偏頭痛動物模型 C-FOS、C-JUN基因表達的影響20-23
• 討論23-34
• 一、 硝酸甘油所致偏頭痛動物模型的評價及機理23-25
• （一） 模型評價23-24
• （二） 作用機理24-25
• 二、 中腦導水管周圍灰質(zhì)（PAG）在偏頭痛中的作用25-29
• （一） 偏頭痛發(fā)病過程中的疼痛產(chǎn)生傳導機制25-27
• （二） 以中腦導水管周圍灰質(zhì)為代表的中樞疼痛整合中樞27-29
• 三、 C-FOS和 C-JUN基因表達在偏頭痛中的意義29-32
• 四、 頭風湯及清熱燥濕法32-34
• （一） 濕熱與偏頭痛32-33
• （二） 頭風湯藥藥物組成及方意33-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻35-38
• 綜述 偏頭痛發(fā)病機制研究及中醫(yī)藥治療38-50
• 參考文獻47-50
• 附錄50-51
• 致謝51-52
• 詳細摘要52-56

【參考文獻】

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  本文關(guān)鍵詞：頭風湯對偏頭痛大鼠模型中腦導水管周圍灰質(zhì)c-fos、c-jun基因表達影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：334730