目的探討低氧狀態(tài)下，人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞survivin表達(dá)是否增強(qiáng)？以利于進(jìn)一步探討FAk是否由survivin信號促進(jìn)細(xì)胞增殖。方法原代培養(yǎng)人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，將細(xì)胞分組為常氧、缺氧30min、1h、2h、4h、8h、12h，用western blotting及免疫熒光檢測survivin蛋白質(zhì)的表達(dá)變化，realtime-PCR檢測細(xì)胞內(nèi)survivin mRNA的表達(dá)水平, CCK8檢測細(xì)胞增殖能力。結(jié)果Western blotting及免疫熒光檢測蛋白水平在予缺氧處理后表達(dá)明顯增加，且在缺氧2h后達(dá)高峰，同樣利用realtime-PCR檢測mRNA水平在缺氧處理后表達(dá)明顯增加，在2h后達(dá)高峰，CCK8檢測在缺氧12h、24h、48h后細(xì)胞增殖能力顯著增高。結(jié)論低氧可導(dǎo)致人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞survivin表達(dá)增加，且survivin信號分子參與了人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖。目的：探討低氧狀態(tài)下，F(xiàn)AK是否由survivin信號促進(jìn)人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖。方法：原代培養(yǎng)人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，體外構(gòu)建合成3條FAKsiRNA，并篩選出1條抑制率最高（至少70%）的抑制人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞F... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

組織貼片法培養(yǎng)HPASMCs

18圖2 ： Calponin-1蛋白在人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)（×200）注：綠色代表胞漿，藍(lán)色代表細(xì)胞核， 可見綠色胞漿中存在條形絲狀物圖3： Calponin-1蛋白在人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)（×200）注：綠色代表胞漿，可見綠色胞質(zhì)中存在條形絲狀物

圖2 ： Calponin-1蛋白在人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)（×200）注：綠色代表胞漿，藍(lán)色代表細(xì)胞核， 可見綠色胞漿中存在條形絲狀物圖3： Calponin-1蛋白在人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)（×200）注：綠色代表胞漿，可見綠色胞質(zhì)中存在條形絲狀物

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Survivin expression in early hepatocellular carcinoma and post-treatment with anti-cancer drug under hypoxic culture condition[J]. Satoshi Mamori,Tadashi Asakura,Kiyoshi Ohkawa,Hisao Tajiri.  World Journal of Gastroenterology. 2007(40)
[2]缺氧促進(jìn)人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞黏著斑激酶表達(dá)[J]. 林春龍,張珍祥,徐永健.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2006(11)
[3]Focal adhesion kinase antisense oligodeoxynucleotides inhibit human pulmonary artery smooth muscle cells proliferation and promote human pulmonary artery smooth muscle cells apoptosis[J]. LIN Chun long, ZHANG Zhen xiang, XU Yong jian, NI Wang and CHEN Shi xin Department, Tongji Hospital,Tongji Medical School, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China (Lin CL, Zhang ZX, Xu YJ, Ni W and Chen SX).  Chinese Medical Journal. 2005(01)



本文編號：3239626