目的 制備豚鼠抗α-毒素血清、純化抗重組金黃色葡萄球菌α-毒素的IgG并應(yīng)用十二烷基硫酸鈉（SDS）-聚丙烯酰胺凝膠（PAGE）電泳檢測(cè),檢測(cè)酵母表達(dá)α-毒素情況。方法 免疫豚鼠,給豚鼠靜脈注射重組α-毒素,制備抗α-毒素血清,利用HiTrap protein A HP純化抗重組金黃色葡萄球菌α-毒素IgG,SDS-PAGE非還原性電泳檢測(cè)純化的IgG。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和免疫熒光共聚焦檢測(cè)酵母表達(dá)α-毒素情況。結(jié)果 成功獲得了豚鼠抗α-毒素血清及所需的抗α-毒素抗體。非還原性電泳觀察到未純化的血清中抗α-毒素抗體濃度較低,穿透峰中抗α-毒素抗體含量較少,洗脫峰中抗α-毒素抗體的純度約為85%。ELISA法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)化子1、2號(hào)與陰性對(duì)照組相比較,基本可以判斷轉(zhuǎn)化子經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)表面展示了α-毒素；免疫熒光共聚焦檢測(cè)發(fā)現(xiàn),經(jīng)過(guò)抗α-毒素抗體染色,1號(hào)酵母轉(zhuǎn)化子表面發(fā)出綠色熒光而未誘導(dǎo)培養(yǎng)基的細(xì)胞表面沒(méi)有熒光。結(jié)論 金黃色葡萄球菌α-毒素在酵母表面展示成功,可以進(jìn)一步應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)臨床或?qū)W術(shù)研究領(lǐng)域,同時(shí)可為研發(fā)酵母展示疫苗提供可靠的鑒定方法。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)師進(jìn)修雜志. 2019,(10)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]高致病性禽流感H5N1康復(fù)者體內(nèi)針對(duì)HA的抗體的表位研究[D]. 左騰.清華大學(xué) 2015

碩士論文
[1]鼠尾草精油納米脂質(zhì)體對(duì)金黃色葡萄球菌生物膜的控制釋放研究[D]. 周慧.江蘇大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3187988