發(fā)布時間：2017-04-18 18:01

  本文關鍵詞：自身免疫調節(jié)因子對DC2.4細胞表型及功能影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：自身免疫調節(jié)因子（Autoimmune regulator，Aire）作為一種轉錄因子，其基因突變能夠引發(fā)多器官自身免疫性疾病-APECED病。研究證實，中樞Aire通過調節(jié)mTECs上TRAs表達，清除自身反應性T細胞維持中樞免疫耐受。在外周，Aire主要表達在DC細胞上，不成熟DC能夠誘導免疫耐受，也有報道稱某些成熟DC也可參與誘導免疫耐受。此外，外周DC也能夠表達TRAs誘導自身反應性T細胞清除或者誘導Treg的產生，維持耐受。但DC上表達的Aire功能和意義還不是很清楚，Aire是否也參與外周免疫耐受機制有待于探討。 基于以上背景，我們推測Aire可能通過影響DC細胞表型和成熟狀態(tài)，以及調節(jié)TRAs表達而參與外周免疫耐受維持。為此，，我們進行了以下幾方面研究： 1.穩(wěn)定轉染Aire的DC2.4細胞的鑒定研究顯示我們前期建立的穩(wěn)定轉染pEGFPC1/Aire（A1-1）、pEGFPC1（C1-1-1）質粒的DC2.4細胞株中Aire和GFP表達良好，可以用于后續(xù)實驗。 2. Aire對DC2.4細胞表型的影響流式細胞術結果顯示某些模式識別受體的配體處理后，A1-1組較C1-1-1組CD80、CD40、CD11c、CD83、CD86和MHC-II類分子表達降低。表明Aire能夠使DC2.4維持不成熟狀態(tài)。 3. Aire對DC2.4細胞增殖能力的影響細胞增殖-毒性檢測測試各組細胞之間增殖能力無明顯差異。表明Aire對DC2.4細胞增殖能力無影響。 4. Aire對DC2.4細胞吞噬能力的影響熒光微球吞噬實驗結果顯示，A1-1組較C1-1-1組細胞吞噬能力增強。表明Aire能夠增強DC2.4吞噬功能，使其維持在不成熟狀態(tài)。 5. Aire對DC2.4細胞TRAs表達的影響聚合酶鏈式反應結果顯示，A1-1組細胞與C1-1-1組細胞相比，多種TRAs表達上調。提示Aire可能通過調節(jié)DC2.4上TRAs的表達參與外周耐受。 本研究發(fā)現(xiàn)Aire可能通過影響DC細胞表型及其吞噬能力使其維持在不成熟狀態(tài)，或者通過調控外周DC上TRAs的表達，參與外周免疫耐受的維持。這有利于揭示Aire在外周免疫系統(tǒng)表達的功能和意義，成為該領域的一創(chuàng)新點。
【關鍵詞】：Aire DC2.4 TRAs 免疫耐受
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R392
【目錄】：

• 提要4-5
• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-14
• 英文縮略詞14-16
• 引言16-18
• 文獻綜述18-28
• 一、自身免疫調節(jié)因子（Aire）的研究進展18-21
• 1. Aire 突變與 APECED 病18-19
• 2. Aire 基因的表達和分布19-20
• 3. Aire 與免疫耐受20-21
• 二、樹突狀細胞的生物學特征和功能21-27
• 1. 樹突狀細胞的發(fā)育與分類21-23
• 2. 樹突狀細胞的功能23-27
• 三、Aire 與樹突狀細胞27-28
• 課題設計思路28-30
• 實驗研究30-64
• 一、材料30-36
• 1. 細胞系30
• 2. 細胞培養(yǎng)所需試劑和配制方法30-31
• 3. 流式細胞術使用抗體及試劑配制31-32
• 4. CCK-8 檢測所需試劑32
• 5. 熒光微球吞噬檢測所需試劑32
• 6. RNA 提取及 RT-PCR 所需試劑32-35
• 7. 主要儀器設備35-36
• 二、實驗方法36-44
• 1. 細胞培養(yǎng)36-37
• 2. 流式細胞術37
• 3. CCK-8 增殖實驗37-38
• 4. 熒光微球吞噬實驗38
• 5. 總 RNA 的提取38-39
• 6. RT（Reverse transcription，RT）反應39
• 7. 普通 PCR 反應39-43
• 8. RT-qPCR 反應43-44
• 9. 結果統(tǒng)計學分析44
• 三、實驗結果44-57
• 四、討論57-61
• 五、結論61-62
• 六、有待于進一步研究的問題62-64
• 參考文獻64-74
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果74-76
• 致謝76-78

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 顧春瑜,鄭磊,王前;樹突狀細胞治療自身免疫性疾病的機制及應用研究進展[J];現(xiàn)代免疫學;2005年03期

  本文關鍵詞：自身免疫調節(jié)因子對DC2.4細胞表型及功能影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：315412