目的:建立穩(wěn)定可重復(fù)的骨骼肌細胞離體胰島素抵抗模型,促進胰島素抵抗病理機制的探索及藥物的研發(fā)與篩選。方法:采用小鼠骨骼肌成肌細胞C2C12為研究對象,分別以正常分化液及含40和60 mmol/L葡萄糖的分化液誘導(dǎo)分化,每天用相差顯微鏡觀察不同濃度葡萄糖處理對細胞匯聚、融合和形成多核肌管的影響;分別在分化1、3、5和7 d后應(yīng)用2-NBDG法檢測不同處理對細胞基礎(chǔ)糖攝取和胰島素刺激糖攝取的影響;在分化5 d和7 d后應(yīng)用Western blot法檢測不同干預(yù)對葡萄糖轉(zhuǎn)運子4（glucose transporter 4,GLUT4）蛋白表達的影響;分化5 d后應(yīng)用免疫熒光組化法檢測不同干預(yù)對GLUT4蛋白分布的影響。結(jié)果:形態(tài)學(xué)結(jié)果顯示,經(jīng)60 mmol/L葡萄糖（高糖）處理3 d后明顯抑制C2C12細胞的生長分化;葡萄糖攝取結(jié)果表明高糖處理5 d和7 d后均明顯抑制C2C12的基礎(chǔ)糖攝取和胰島素刺激的糖攝�。≒<0.01）,且處理5 d后胰島素刺激的糖攝取與基礎(chǔ)糖攝取的差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性（P>0.05）; Western blot檢測結(jié)果表明高糖處理5 d和7 d后,胰島素刺... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2019,35(09)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

＊＊P＜0．01vsPBSgroup;

0.01)，見圖4。以上結(jié)果提示高糖干預(yù)5d明顯降低C2C12細胞膜GLUT4表達量，且存在劑量依賴性，以60mmol/L葡萄糖干預(yù)抑制效果最明顯，說明60mmol/L葡萄糖干預(yù)不僅導(dǎo)致細胞中GLUT4蛋白表達降低，同時抑制GLUT4蛋白向細胞膜的轉(zhuǎn)運，抑制C2C12細胞葡萄糖的攝取。Figure2．ThechangesofglucoseuptakeintheC2C12cellstreatedwithglucoseatdifferentconcentrations．Mean±SD．n=6．*P＜0．05，＊＊P＜0．01vsPBSgroup;##P＜0．01vscontrolgroup．圖2不同濃度葡萄糖干預(yù)不同時長對C2C12細胞葡萄糖攝取能力的影響Figure3．ThechangesofGLUT4proteinexpressionintheC2C12cellstreatedwithglucoseatdifferentconcentrationsfor5d(A)and7d(B)respectively．Mean±SD．n=6．*P＜0．05，＊＊P＜0．01vsPBSgroup．圖3不同濃度葡萄糖干預(yù)不同時長對C2C12細胞GLUT4蛋白表達的影響·5271·

【參考文獻】：
期刊論文
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