目的：單核/巨噬細胞的趨化運動是機體免疫應答、炎癥反應、腫瘤轉移的重要環(huán)節(jié)。我們之前的研究已表明PKCζ是調節(jié)單核/巨噬細胞趨化運動的關鍵分子。在對PKCζ進行蛋白組學研究時,采用質譜分析的方法篩選并鑒定了一個PKCζ的新結合分子-C1QBP。我們前期研究發(fā)現應用小RNA干擾技術C1QBP沉默可以抑制CSF-1誘導的單核/巨噬細胞的趨化運動。由此提出：C1QBP可能通過調控PKCζ的活性來調節(jié)單核/巨噬細胞的趨化運動。本研究擬建立C1QBP低表達細胞株,探討其對單核/巨噬細胞遷移、黏附能力的影響,初步明確C1QBP在單核/巨噬細胞趨化運動中的作用機制。本研究初步闡明了C1QBP通過PKCζ調控單核/巨噬細胞趨化運動的作用機理,對深入探討炎癥性疾病的發(fā)病機制和探索防治腫瘤的新措施具有重要意義。方法：1.用免疫共沉淀的方法檢測PKCζ與C1QBP的相互作用。2.用免疫熒光的方法檢測C1QBP與PKCζ在細胞中的定位情況。3.應用StealthTM NA降低單核/巨噬細胞中C1QBP蛋白的表達水平,用Western Blotting驗證其表達。4.應用慢病毒載體介導的RNA干擾技術構建C1Q... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數】：68 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現狀、成果
    研究目的、方法
1 對象和方法
    1.1 細胞系
    1.2 質粒
    1.3 常規(guī)試劑和耗材
    1.4 各實驗所需主要試劑及溶液的配制
    1.5 主要儀器設備
    1.6 實驗方法
    1.7 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 C1QBP及PKCζ在細胞中的表達
    2.2 C1QBP降表達對THP-1細胞趨化運動的影響
    2.3 C1QBP降表達對THP-1細胞聚合能力的影響
    2.4 共聚焦顯微鏡觀察C1QBP及PKCζ在THP-1細胞中的表達及定位
    2.5 C1QBP與PKCζ在THP-1細胞中的相互作用
    2.6 利用慢病毒載體建立C1QBP穩(wěn)定降表達的細胞系RAW264.7
    2.7 C1QBP降表達減弱RAW264.7細胞遷移能力
    2.8 C1QBP與PKCζ在RAW264.7細胞中存在相互作用
    2.9 共聚焦顯微鏡觀察C1QBP及PKCζ在RAW細胞中的表達及定位
    2.10 C1QBP表達降低減弱RAW264.7細胞趨化運動
    2.11 C1QBP表達降低減弱RAW264.7細胞黏附能力
    2.12 C1QBP表達降低對相關信號蛋白磷酸化水平的影響
3 討論
4 小結
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻
致謝



本文編號：3073846