不同低氧濃度對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響
發(fā)布時(shí)間：2021-01-28 22:03
目的探討不同低氧濃度對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUCMSCs）誘導(dǎo)分化成神經(jīng)細(xì)胞的促進(jìn)作用。方法hUCMSCs分為對(duì)照組（常氧濃度）和實(shí)驗(yàn)組（5%氧濃度組、10%氧濃度組）。MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖;乳酸脫氫酶（LDH）法檢測(cè)細(xì)胞損傷;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡; Weston Blot檢測(cè)細(xì)胞神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）、神經(jīng)巢蛋白（Nestin）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）的表達(dá)。結(jié)果 hUCMSCs細(xì)胞在缺氧條件下細(xì)胞增殖受到抑制,培養(yǎng)24 h內(nèi)實(shí)驗(yàn)組OD值顯著低于對(duì)照組（P <0. 05）,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖加快,到培養(yǎng)至96 h時(shí)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P> 0. 05）。在培養(yǎng)24、48 h時(shí),實(shí)驗(yàn)組hUCMSCs細(xì)胞LDH活性顯著高于對(duì)照組（P <0. 05）;培養(yǎng)至72 h后5%氧濃度組LDH活性顯著高于對(duì)照組（P <0. 05）,10%氧濃度組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0. 05）;培養(yǎng)至96 h后各組hUCMSCs細(xì)胞LDH的活性比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P> 0. 05）。5%氧濃度組hUCMSCs細(xì)胞抗凋亡作...
【文章來源】：解放軍醫(yī)藥雜志. 2019,31(08)
【文章頁數(shù)】：6 頁
【部分圖文】：
各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)96h后凋亡細(xì)胞率對(duì)照組10%氧濃度組5%氧濃度組
96h后hUCMSCs細(xì)胞經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)，各組凋亡細(xì)胞率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。見圖1。1%低氧培養(yǎng)12h時(shí)誘導(dǎo)hUCMSCs凋亡，5%氧濃度組、10%氧濃度組凋亡細(xì)胞率低于對(duì)照組(P＜0．05);缺氧培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)組(5%氧濃度組、10%氧濃度組)細(xì)胞具有抗細(xì)胞凋亡作用，5%氧濃度組抗凋亡作用強(qiáng)于10%氧濃度組(P＜0．05)。見圖2。對(duì)照組10%氧濃度組5%氧濃度組96%h圖1各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)96h后凋亡細(xì)胞率誘導(dǎo)凋亡對(duì)照組10%氧濃度組5%氧濃度組圖2各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡后凋亡細(xì)胞率2.4神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)分化加入成神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)的第3天，5%低氧培養(yǎng)組的hUCMSCs細(xì)胞增殖·8·解放軍醫(yī)藥雜志2019年8月第31卷第8期Med＆PharmJChinPLA，Vol．31，No．8，August．2019
質(zhì)收縮，折光性增強(qiáng)。10%低氧培養(yǎng)組和對(duì)照組的hUCMSCs細(xì)胞未見明顯異常。誘導(dǎo)培養(yǎng)的第5天，5%低氧培養(yǎng)組hUCMSCs細(xì)胞為長(zhǎng)梭形，胞質(zhì)和胞核偏向細(xì)胞一側(cè)，有雙極或多極突起，突起細(xì)而長(zhǎng)，末端分叉，具有典型的神經(jīng)元樣形態(tài);有少量hUCMSCs細(xì)胞死亡，脫落呈圓球型的漂浮細(xì)胞。10%低氧培養(yǎng)組hUC-MSCs細(xì)胞形態(tài)開始發(fā)生變化，胞質(zhì)收縮。對(duì)照組hUCMSCs細(xì)胞形態(tài)未見明顯異常，但細(xì)胞開始呈分散狀態(tài)生長(zhǎng)。見圖3。誘導(dǎo)培養(yǎng)第3天誘導(dǎo)培養(yǎng)第5天對(duì)照組10%氧濃度組5%氧濃度組圖3各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成神經(jīng)誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài)變化2.5各組hUCMSCs中神經(jīng)元相關(guān)蛋白的表達(dá)成神經(jīng)誘導(dǎo)第5天時(shí)，5%氧濃度組和10%氧濃度組hUCMSCs細(xì)胞中NGF、Nestin、NSE的表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P＜0．05)。見圖4。240%KD140%KD78%KD42%KDNestinNGFNSEActin對(duì)照組5%氧濃度組10%氧濃度組圖4各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞神經(jīng)元相關(guān)蛋白的表達(dá)檢測(cè)NGF為神經(jīng)生長(zhǎng)因子，NSE為神經(jīng)元特異性烯醇化酶，Nestin為神經(jīng)巢蛋白3討論hUCMSCs是一種存于胚胎組織廢棄物———臍帶華通膠中的干細(xì)胞，來源于發(fā)育早期由中胚層，形態(tài)和生物學(xué)特性與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相似，可以跨胚層誘導(dǎo)分化為骨、軟骨、真皮組織、骨骼肌、心肌細(xì)胞及神經(jīng)元等多種類型細(xì)胞［5-6］，在組織再生和創(chuàng)傷修復(fù)等方面具有重要作用。目前國內(nèi)外多家干細(xì)胞治療中心已開展了hUCMSCs治療帕金森病、脊髓損傷、腦癱、多發(fā)性硬化、老年癡呆、脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)等神經(jīng)系統(tǒng)疾病的臨床研究。在正常的生理狀態(tài)下，人體大部分組織
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]palliative care and end-stage colorectal cancer management:The surgeon meets the oncologist[J]. Renato Costi,Francesco Leonardi,Daniele Zanoni,Vincenzo Violi,Luigi Roncoroni. World Journal of Gastroenterology. 2014(24)
[2]人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)、鑒定及其誘導(dǎo)分化的研究[J]. 王曉輝,惠玲,楊霄鵬,王鯤,楊雯,哈小琴. 解放軍醫(yī)藥雜志. 2013(10)
本文編號(hào)：3005772
【文章來源】：解放軍醫(yī)藥雜志. 2019,31(08)
【文章頁數(shù)】：6 頁
【部分圖文】：
各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)96h后凋亡細(xì)胞率對(duì)照組10%氧濃度組5%氧濃度組
96h后hUCMSCs細(xì)胞經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)，各組凋亡細(xì)胞率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。見圖1。1%低氧培養(yǎng)12h時(shí)誘導(dǎo)hUCMSCs凋亡，5%氧濃度組、10%氧濃度組凋亡細(xì)胞率低于對(duì)照組(P＜0．05);缺氧培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)組(5%氧濃度組、10%氧濃度組)細(xì)胞具有抗細(xì)胞凋亡作用，5%氧濃度組抗凋亡作用強(qiáng)于10%氧濃度組(P＜0．05)。見圖2。對(duì)照組10%氧濃度組5%氧濃度組96%h圖1各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)96h后凋亡細(xì)胞率誘導(dǎo)凋亡對(duì)照組10%氧濃度組5%氧濃度組圖2各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡后凋亡細(xì)胞率2.4神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)分化加入成神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)的第3天，5%低氧培養(yǎng)組的hUCMSCs細(xì)胞增殖·8·解放軍醫(yī)藥雜志2019年8月第31卷第8期Med＆PharmJChinPLA，Vol．31，No．8，August．2019
質(zhì)收縮，折光性增強(qiáng)。10%低氧培養(yǎng)組和對(duì)照組的hUCMSCs細(xì)胞未見明顯異常。誘導(dǎo)培養(yǎng)的第5天，5%低氧培養(yǎng)組hUCMSCs細(xì)胞為長(zhǎng)梭形，胞質(zhì)和胞核偏向細(xì)胞一側(cè)，有雙極或多極突起，突起細(xì)而長(zhǎng)，末端分叉，具有典型的神經(jīng)元樣形態(tài);有少量hUCMSCs細(xì)胞死亡，脫落呈圓球型的漂浮細(xì)胞。10%低氧培養(yǎng)組hUC-MSCs細(xì)胞形態(tài)開始發(fā)生變化，胞質(zhì)收縮。對(duì)照組hUCMSCs細(xì)胞形態(tài)未見明顯異常，但細(xì)胞開始呈分散狀態(tài)生長(zhǎng)。見圖3。誘導(dǎo)培養(yǎng)第3天誘導(dǎo)培養(yǎng)第5天對(duì)照組10%氧濃度組5%氧濃度組圖3各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成神經(jīng)誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài)變化2.5各組hUCMSCs中神經(jīng)元相關(guān)蛋白的表達(dá)成神經(jīng)誘導(dǎo)第5天時(shí)，5%氧濃度組和10%氧濃度組hUCMSCs細(xì)胞中NGF、Nestin、NSE的表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P＜0．05)。見圖4。240%KD140%KD78%KD42%KDNestinNGFNSEActin對(duì)照組5%氧濃度組10%氧濃度組圖4各組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞神經(jīng)元相關(guān)蛋白的表達(dá)檢測(cè)NGF為神經(jīng)生長(zhǎng)因子，NSE為神經(jīng)元特異性烯醇化酶，Nestin為神經(jīng)巢蛋白3討論hUCMSCs是一種存于胚胎組織廢棄物———臍帶華通膠中的干細(xì)胞，來源于發(fā)育早期由中胚層，形態(tài)和生物學(xué)特性與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相似，可以跨胚層誘導(dǎo)分化為骨、軟骨、真皮組織、骨骼肌、心肌細(xì)胞及神經(jīng)元等多種類型細(xì)胞［5-6］，在組織再生和創(chuàng)傷修復(fù)等方面具有重要作用。目前國內(nèi)外多家干細(xì)胞治療中心已開展了hUCMSCs治療帕金森病、脊髓損傷、腦癱、多發(fā)性硬化、老年癡呆、脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)等神經(jīng)系統(tǒng)疾病的臨床研究。在正常的生理狀態(tài)下，人體大部分組織
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]palliative care and end-stage colorectal cancer management:The surgeon meets the oncologist[J]. Renato Costi,Francesco Leonardi,Daniele Zanoni,Vincenzo Violi,Luigi Roncoroni. World Journal of Gastroenterology. 2014(24)
[2]人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)、鑒定及其誘導(dǎo)分化的研究[J]. 王曉輝,惠玲,楊霄鵬,王鯤,楊雯,哈小琴. 解放軍醫(yī)藥雜志. 2013(10)
本文編號(hào)：3005772
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