目的：探討KiSS-1/GPR54系統(tǒng)在子宮內(nèi)膜的表達、定位及其在蛻膜化中作用。方法：1、通過實時定量PCR、免疫組織化學(xué)等方法觀察小鼠圍植入期子宮內(nèi)膜組織中KiSS-1和GPR54的表達水平及表達部位變化。2、運用在體人工蛻膜化模型，觀察KiSS-1、GPR54的表達是否受活化胚胎的影響。3、構(gòu)建去卵巢及性甾體激素處理的子宮模型，觀察甾體激素對KiSS-1和GPR54表達的影響。4、通過子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞分離、培養(yǎng)及體外誘導(dǎo)分化，檢測在離休狀態(tài)下蛻膜化過程中KiSS-1、GPR54表達水平的變化。5、通過RNA干擾技術(shù)，觀察KiSS-1對小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞蛻膜化的影響。結(jié)果：1、實時定量PCR結(jié)果顯示，在妊娠D1-D5天，KiSS-1、GPR54mRNA表達量均較低。隨著蛻膜化的進程（妊娠D6-D8天），與妊娠D1天相比，KiSS-1和GPR54mRNA的表達量均顯著性增加（P<0.01）。免疫組化結(jié)果顯示，在小鼠妊娠D1-4天，KiSS-1和GPR54蛋白主要定位于腔上皮和腺上皮細胞上，且表達水平較低，與實時定量PCR結(jié)果相一致。從妊娠D5天開始，KiSS-1和GPR54蛋白... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

KiSS-1、GPR54mRNA和蛋白在小鼠圍植入期子宮內(nèi)膜的表達A,圍植入期小鼠子宮KiSS-1mRNA表達水平的變化(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤，n=3)

圖 2. KiSS-1、GPR54 在小鼠人工誘導(dǎo)蛻膜化子宮的表達A, 人工誘導(dǎo)蛻膜化子宮，其中左側(cè)為對照組，右側(cè)為芝麻油組。B, KiSS-1 mRNA 在體內(nèi)人工誘導(dǎo)蛻膜化小鼠子宮中的表達，*, P<0.05; **, P<0.01 與對照相比較。C, KiSS-1 蛋白在人工誘導(dǎo)蛻膜化假孕第 5 至 8 天小鼠子宮內(nèi)膜中的定位。D, GPR54 mRNA 在體內(nèi)人工誘導(dǎo)蛻膜化小鼠子宮中的表達，*, P<0.05; **, P<0.01 與對照相比較。E, GPR54 蛋白在人工誘導(dǎo)蛻膜化假孕第 5 至 8 天小鼠子宮內(nèi)膜中的定位。放大倍數(shù)：×200；de 蛻膜; em 胚胎; ge 腺上皮; le 腔上皮; Con 對照組; Neg Con 陰性對照。Fig.2 Expression of KiSS-1 and GPR54 in mouse uterus during artificial decidualization.A. The uterus of artificial decidualization. Left,control group; right, sesame oil group.B.KiSS-1 mRNA expression in mouse uterus of artificial decidualization. *, P<0.05; **, P<0.01as compared with control.C.KiSS-1 protein expression in mouse endometriumof artificial decidualization on day 5 to day 8of pseudopregnancy.D.GPR54 mRNA expression in mouse uterus of artificial decidualization. *, P<0.05; **, P<0.01as compared with control.E.GPR54 protein expression in mouse endometrium of artificial decidualization on day 5 to day 8

4的拮抗劑 RU486 共同處理后則抑制了KiSS-1 mRNA表達上調(diào)的效應(yīng)(圖3.A) (P<0.05 ,n=10)；E2和其拮抗劑Tam共同處理后，則進一步增強 E2對 KiSS-1 mRNA 表達上調(diào)的效應(yīng)(圖 3.B)(P<0.05 ,n=10)。圖 3. 在去卵巢模型中甾體激素對小鼠子宮 KiSS-1 mRNA 表達的影響

【參考文獻】：
期刊論文
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[6]GPR54/kisspeptin的生殖內(nèi)分泌作用研究進展[J]. 孫妍,趙宏,田占莊.  國際病理科學(xué)與臨床雜志. 2005(05)



本文編號：3004971