為增強(qiáng)抗EGFR或抗VEGFR2（KDR）單克隆抗體的抗腫瘤作用,作者將抗人EGFR單克隆抗體（Cetuximab）可變區(qū)基因和抗人KDR單克隆抗體（m Ab-04）可變區(qū)基因融合并與人Ig G1的Fc段基因通過柔性肽連接在一起,得到全人源Ig G樣抗EGFR/抗KDR雙特異性抗體（Bi-Ab）的基因。將Bi-Ab基因插入載體p PICZα,轉(zhuǎn)化畢赤酵母X-33并誘導(dǎo)表達(dá)。發(fā)酵液經(jīng)硫酸銨沉淀法初步提取后采用Protein A親和層析柱進(jìn)一步分離純化,得到電泳純的Bi-Ab蛋白,其產(chǎn)量約為2.3 mg/L發(fā)酵液。表面等離子共振法（SPR）分析顯示,Bi-Ab與EGFR或KDR的結(jié)合親和力與其親本Cetuximab或m Ab-04相近,表明該雙特異性抗體Bi-Ab能與EGFR和KDR特異性結(jié)合,可用于進(jìn)一步的抗腫瘤活性研究。 

【文章來源】：藥物生物技術(shù). 2015年03期

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料
2 方法
    2. 1 抗 EGFR / 抗 KDR Bi-Ab 的構(gòu)建
    2. 2 抗 EGFR / 抗 KDR 雙特異性抗體 Bi-Ab 的表達(dá)
    2. 3 抗 EGFR / 抗 KDR 雙特異性抗體 Bi-Ab 的純化
    2. 4 抗 EGFR / 抗 KDR Bi-Ab 的 Western blotting 鑒定
    2. 5 抗 EGFR / 抗 KDR Bi-Ab 與抗原親和力的測定
3 結(jié)果
    3. 1 Bi-Ab 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
    3. 2 Bi-Ab 的表達(dá)和純化
    3. 3 Bi-Ab 的 Western blotting 鑒定
    3. 4 Bi-Ab 對兩種抗原親和力的測定
4 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]單克隆抗體藥物研究進(jìn)展[J]. 李壯林,姚雪靜.  藥物生物技術(shù). 2014(05)
[2]雙功能抗體藥物研究進(jìn)展[J]. 李鋒,黎曉維,沈倍奮.  中國醫(yī)藥生物技術(shù). 2014(04)
[3]抗KDR單鏈抗體阻斷VEGF/KDR通路的活性研究[J]. 李海鑫,陳治國,陳晨,金海珍,張娟,王旻.  藥物生物技術(shù). 2014(01)
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本文編號：2940513