心肌祖細(xì)胞增殖和分化是心臟損傷后修復(fù)再生的基礎(chǔ),而Isl1被認(rèn)為是心肌祖細(xì)胞的特異性標(biāo)志。為了研究以及示蹤Isl1+心肌祖細(xì)胞及其分化后代,該文嘗試?yán)贸纱匾?guī)律間隔短回文重復(fù)序列CRISPR/Cas9系統(tǒng),將Cre ERT2定點(diǎn)插入到小鼠Isl1內(nèi)源基因啟動(dòng)子之后,建立了Cre ERT2基因敲入小鼠模型。通過(guò)與Rosa26-lox P-neo-lox P-lac Z小鼠（Rosa26-lac Z+）交配,獲得Isl1-Cre ERT（KI）/Rosa26-lac Z+雙雜合小鼠。經(jīng)過(guò)基因型鑒定、組織表達(dá)譜測(cè)定和X-gal染色、冰凍切片和石蠟切片等方法,確認(rèn)基因敲入小鼠的Cre ERT2表達(dá)在成年小鼠心臟竇房結(jié)、心臟神經(jīng)節(jié)、主動(dòng)脈弓和肺動(dòng)脈根部,與文獻(xiàn)報(bào)道的Isl1表達(dá)部位相同。該研究建立的模型可為研究心肌祖細(xì)胞的增殖和譜系示蹤提供重要的模型。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2015年10期

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1材料與方法
    1.1材料
    1.2方法
2結(jié)果
    2.1 F0代小鼠的獲得與繁育
    2.2 Isl1-Cre ERT（KI）/Rosa26-lac Z+雙雜合小鼠Cre ERT2和Isl1組織表達(dá)水平的檢測(cè)
    2.3 Isl1-Cre ERT2（KI）/Rosa26-lac Z雙陽(yáng)性小鼠心臟組織Lac Z染色的組織學(xué)鑒定
3討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CRISPR-Cas9技術(shù)在干細(xì)胞中的應(yīng)用[J]. 梁丹,吳宇軒,李勁松.  生命科學(xué). 2015(01)
[2]有氧運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)心肌肥大和心肌細(xì)胞增殖的研究進(jìn)展[J]. 周云鶴.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2013(10)
[3]基因譜系示蹤技術(shù)揭示小鼠Tbx18+心臟祖細(xì)胞向心系細(xì)胞分化的潛能[J]. 杜建霖,張進(jìn),蒲荻,高二志,楊景濤,高凌志,夏爽,鄧松柏,佘強(qiáng).  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2011(02)



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