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酵母雙雜交篩選PA28γ相互作用蛋白

發(fā)布時(shí)間:2017-04-08 05:19

  本文關(guān)鍵詞:酵母雙雜交篩選PA28γ相互作用蛋白,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的通過(guò)酵母雙雜交篩選與蛋白酶體激活因子3(PA28γ)相互作用的肝細(xì)胞蛋白,為研究其在肝癌的發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制提供新依據(jù)。方法通過(guò)酵母雙雜交技術(shù),構(gòu)建PGBKT7-PA28γ蛋白酶體激活因子酵母雙雜交誘餌載體,以PA28γ為誘餌,在人類肝細(xì)胞cDNA文庫(kù)中篩選與之相互作用的蛋白,并將部分陽(yáng)性基因構(gòu)建表達(dá)載體后與PA28γ共轉(zhuǎn)染于AGS細(xì)胞進(jìn)行初步驗(yàn)證。結(jié)果篩選出32個(gè)陽(yáng)性克隆,其中有5個(gè)與肝癌細(xì)胞周期及凋亡密切相關(guān),如ZPR9。將PWPI-PA28γ和Pcmv-myc-ZPR9共轉(zhuǎn)染AGS細(xì)胞,檢測(cè)發(fā)現(xiàn)PA28γ含量與ZPR9負(fù)相關(guān)。結(jié)論成功篩選到一些與肝癌細(xì)胞周期及凋亡相關(guān)的蛋白,為研究其機(jī)制提供了良好的線索和基礎(chǔ)。
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】PAγ 蛋白酶體 酵母雙雜交
【基金】:國(guó)家863課題資助項(xiàng)目(2012AA020205)
【分類號(hào)】:Q78
【正文快照】: PA28γ(又稱REGγ、11Sγ、PSME3)是一種蛋白酶體調(diào)節(jié)因子,它能結(jié)合到20S蛋白酶體的外環(huán)并促進(jìn)小肽的降解,這個(gè)過(guò)程并不依賴蛋白的泛素化,也不依賴腺嘌呤核苷三磷酸[1]。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)酵母雙雜交篩選與PA28γ相互作用的肝細(xì)胞蛋白,為研究其對(duì)肝癌細(xì)胞周期及凋亡的影響提供線

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 覃晴;郭福春;羅順濤;李曉玉;劉曉柯;王永生;;REGγ促進(jìn)肺癌細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年02期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 楊春華;PTEN負(fù)調(diào)控癌蛋白AIB1的機(jī)理[D];大連理工大學(xué);2013年

2 李磊;REGγ缺陷通過(guò)CK1δ-Mdm2-p53通路導(dǎo)致小鼠發(fā)生早衰[D];華東師范大學(xué);2013年

3 王露;SUMO化修飾影響REGγ功能的分子機(jī)制及REGγ的生物學(xué)功能研究[D];華東師范大學(xué);2013年

4 趙登攀;REGγ介導(dǎo)P53降解的生理及病理機(jī)制研究[D];華東師范大學(xué);2013年

5 賈彩鳳;REGγ調(diào)控脂質(zhì)代謝的研究[D];華東師范大學(xué);2014年

6 王卓;REGγ及其調(diào)控蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的機(jī)制初探[D];華東師范大學(xué);2013年

7 李平;人源2OS蛋白酶體激活因子REGγ結(jié)構(gòu)與功能研究[D];南開大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 覃世逆;酵母雙雜交篩選PA28γ相互作用蛋白[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

2 梁忠爽;反油酸誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用機(jī)制的研究[D];南昌大學(xué);2013年

3 萬(wàn)振興;p53對(duì)PA28γ基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響[D];湖南師范大學(xué);2014年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 陳小慧;費(fèi)菲;向海英;韓成貴;程玉琴;;用酵母雙雜交篩選與南瓜蚜傳黃化病毒MP互作的寄主因子[J];植物保護(hù)學(xué)報(bào);2010年04期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李晨;Necl家族蛋白胞外區(qū)的表達(dá)純化與胞內(nèi)區(qū)相互作用蛋白的篩查[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年


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本文編號(hào):292154

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