目的 利用miniSOG標(biāo)簽觀察鼻病毒非結(jié)構(gòu)蛋白2B蛋白在細胞中定位及自噬體產(chǎn)生。方法 將非結(jié)構(gòu)蛋白2B和miniSOG進行融合表達構(gòu)建pcDNA3.1-2B-miniSOG-flag質(zhì)粒,將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293細胞,在熒光顯微鏡下,2B-miniSOG陽性細胞進行固定、光氧化及超薄切片制備,電鏡下觀察2B-miniSOG蛋白在細胞中的定位及細胞超微結(jié)構(gòu)變化,Western blot（WB）檢測LC3的表達。結(jié)果 2B-miniSOG蛋白在熒光顯微鏡下發(fā)出綠色熒光,WB檢出自噬標(biāo)志性蛋白LC3－II表達增加。電鏡下觀察到蛋白定位于線粒體,細胞中出現(xiàn)大量囊泡樣結(jié)構(gòu),可觀察到自噬體和自噬溶酶體。結(jié)論 鼻病毒非結(jié)構(gòu)蛋白2B可引起細胞自噬發(fā)生。 

【文章來源】：中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志. 2019年01期 第21-24頁

【文章頁數(shù)】：4 頁


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