血清饑餓處理對(duì)人角質(zhì)形成細(xì)胞系HaCaT細(xì)胞自噬的調(diào)控效應(yīng)研究
本文關(guān)鍵詞:血清饑餓處理對(duì)人角質(zhì)形成細(xì)胞系HaCaT細(xì)胞自噬的調(diào)控效應(yīng)研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:細(xì)胞的自穩(wěn)是通過(guò)對(duì)細(xì)胞內(nèi)成分合成和降解的精確調(diào)節(jié)而實(shí)現(xiàn)。細(xì)胞內(nèi)降解物質(zhì)的途徑有兩類(lèi),一類(lèi)是蛋白酶體途徑,主要降解短壽命蛋白質(zhì),還有一類(lèi)就是自噬途徑,主要降解長(zhǎng)壽命蛋白質(zhì)及細(xì)胞器。自噬存在于所有的真核細(xì)胞中,它對(duì)于保持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定很重要。自噬可分為三類(lèi):巨自噬(macroautophagy)、微自噬(mieroautophagy)和分子伴侶介導(dǎo)的自噬(chap rone mediated autophagy)。巨自噬是胞漿內(nèi)成份進(jìn)行循環(huán)的主要途徑,通常所說(shuō)的自噬就是指巨自噬。饑餓是細(xì)胞自噬最為重要的誘導(dǎo)因素,然而目前饑餓對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞自噬調(diào)控效應(yīng)的研究資料較為缺乏。 目的研究血清饑餓處理對(duì)人角質(zhì)形成細(xì)胞系HaCaT細(xì)胞自噬的調(diào)控效應(yīng),并初步分析其分子機(jī)制,進(jìn)而為通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞的自噬水平控制和治療皮膚病打下基礎(chǔ)。 方法對(duì)體外培養(yǎng)的HaCaT細(xì)胞進(jìn)行血清饑餓處理,使用透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)改變,使用western-blot方法進(jìn)行自噬標(biāo)志性分子LC3Ⅱ蛋白表達(dá)分析,進(jìn)而對(duì)mTOR的蛋白表達(dá)及其ser2448位點(diǎn)磷酸化產(chǎn)物水平進(jìn)行分析。 結(jié)果電鏡觀察發(fā)現(xiàn)血清饑餓處理的細(xì)胞中有自噬體囊泡形成;western-blot顯示LC3Ⅱ蛋白表達(dá)較正常培養(yǎng)的細(xì)胞顯著上調(diào)。血清饑餓處理的細(xì)胞中mTOR的ser2448位點(diǎn)磷酸化產(chǎn)物水平顯著降低。 結(jié)論血清饑餓處理可以誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞發(fā)生自噬,并且這種自噬活性的誘導(dǎo)可能與自噬調(diào)控關(guān)鍵元件mTOR的ser2448位點(diǎn)磷酸化產(chǎn)物水平降低相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:血清饑餓 角質(zhì)形成細(xì)胞 自噬
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類(lèi)號(hào)】:R363
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-7
- 縮略表7-8
- 前言8-13
- 研究現(xiàn)狀、成果8-12
- 研究目的、方法12-13
- 1、材料13-22
- 1.1 、細(xì)胞13
- 1.2 、試劑13-14
- 1.3 、儀器14
- 2、方法14
- 2.1 、細(xì)胞培養(yǎng)14-16
- 2.2 、血清饑餓處理16
- 2.3 、透射電鏡分析16-17
- 2.4 、Western Blot實(shí)驗(yàn)17-22
- 3、結(jié)果22-27
- 3.1 、常規(guī)細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變22-23
- 3.2 、透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)23-25
- 3.3 、LC3 Ⅱ表達(dá)分析結(jié)果25
- 3.4 、mTOR表達(dá)及其ser2448位點(diǎn)磷酸化水平分析25-27
- 4、討論27-30
- 結(jié)論30-31
- 參考文獻(xiàn)31-34
- 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明34-35
- 綜述一、紫外線(xiàn)治療皮膚病的研究進(jìn)展35-49
- 參考文獻(xiàn)44-49
- 綜述二、紫外線(xiàn)對(duì)皮膚細(xì)胞自噬相關(guān)信號(hào)通路的調(diào)控作用研究49-59
- 參考文獻(xiàn)56-59
- 致謝59-61
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):287265
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