【摘要】：目的 觀察胰腺B細(xì)胞株MIN6細(xì)胞分泌胰島素動(dòng)態(tài)過(guò)程中細(xì)胞形態(tài)的變化,從而為研究細(xì)胞分泌過(guò)程中細(xì)胞內(nèi)的變化提供依據(jù)。 方法 圖像增強(qiáng)的微分干涉顯微鏡(VEC-DIC)被用來(lái)觀察給予刺激因素前后細(xì)胞形態(tài)的改變。共焦點(diǎn)熒光顯微鏡被用于觀察新形成的空泡與細(xì)胞膜的關(guān)系。全反射熒光顯微鏡被用來(lái)觀察MIN6細(xì)胞中胰島素分泌顆粒的分泌過(guò)程以及這種分泌與形態(tài)學(xué)改變的關(guān)系。 結(jié)果 給予刺激因素后,MIN6細(xì)胞出現(xiàn)多種形態(tài)的空泡或者內(nèi)陷。這些空泡主要出現(xiàn)在相鄰的兩個(gè)細(xì)胞之間,并且可以被EGTA,一種鈣離子螯合劑在細(xì)胞外所阻斷。肉毒桿菌神經(jīng)毒素可以阻斷分泌的過(guò)程但是并不能阻斷空泡的形成,細(xì)胞松弛素D不能阻斷空泡的形成,但是可以延長(zhǎng)空泡的持續(xù)時(shí)間。 結(jié)論 MIN6細(xì)胞胰島素的分泌和分泌過(guò)程中空泡的形成有著同一始發(fā)因素—細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的升高。分泌和空泡形成卻有著不同的發(fā)生機(jī)制�？�
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【圖文】：

粒在空泡消失后重新出現(xiàn)在原來(lái)的部位，但是也有一些順粒永久地消失了。葡萄糖刺激和KCI刺激引起的細(xì)胞形態(tài)變化有明顯的區(qū)別，KCI刺激后空泡的出現(xiàn)比葡萄糖刺激后較快的出現(xiàn)(見(jiàn)圖1)。KCI刺激后空泡開(kāi)始出現(xiàn)的時(shí)間為12士345，而葡萄糖刺激后為30士7.55�？张莩掷m(xù)的時(shí)間在KCI刺激為189土385而在葡萄糖為125，115。圖1高濃度葡萄糖和Ka刺激后細(xì)胞形態(tài)的改變。A:22mM葡萄糖刺激:B50nIMKa刺激HTI石顯示細(xì)胞形態(tài)變化HTPS是一種水溶性但不能通過(guò)細(xì)胞膜的熒光染料。應(yīng)用ITnS可以清楚地顯現(xiàn)出細(xì)胞的形態(tài)。在給予刺激因素后，很多亮的區(qū)域出現(xiàn)，特別是在兩個(gè)細(xì)胞之間。在刺激開(kāi)始時(shí)，許多亮的空泡狀區(qū)域出現(xiàn)，在共焦點(diǎn)熒光顯微鏡下呈現(xiàn)出串珠樣改變。這種改變逐漸的縮小和消失。調(diào)節(jié)共焦點(diǎn)平面，可以發(fā)現(xiàn)這種串珠樣區(qū)域?qū)嶋H是細(xì)胞膜內(nèi)陷造成的，并且與細(xì)胞外空間相通(見(jiàn)圖2)。

應(yīng)用HTI喀給予刺激后得到的共焦點(diǎn)圖像

表現(xiàn)為單峰。給予高濃度KCI刺激后，C擴(kuò)+濃度很快升高，而給予葡萄糖刺激則升高的很緩慢(見(jiàn)圖3)。細(xì)胞外的C擴(kuò)+被徹底根除后，給予刺激因素并沒(méi)有細(xì)胞形態(tài)改變發(fā)生(見(jiàn)圖4)。1.601.401.201.00.0800.60.040.020.000gzueose束嶸者.‘.藝

本文編號(hào)：2793083