【摘要】：目的： 1.模仿胸主動脈瘤、胸腹主動脈瘤修復(fù)術(shù)對脊髓血供的影響,建立一個貼近臨床實際工作、操作較為簡單、可重復(fù)性較高、延遲性癱瘓發(fā)生率較高、實驗動物死亡率較低、存活時間較長的大鼠脊髓缺血后延遲性癱瘓的動物模型,探討導(dǎo)致延遲性癱瘓的主要危險因素。 2.觀察延遲性癱瘓大鼠脊髓的病理改變,探討脊髓缺血后延遲性癱瘓可能的發(fā)生機制。 3.依據(jù)本研究提出的脊髓缺血后延遲性癱瘓可能的發(fā)病機制,進行治療,觀察治療效果,并對本研究關(guān)于脊髓缺血后延遲性癱瘓發(fā)病機制的假說加以驗證。 方法： 1.選取SD大鼠為實驗動物,模擬胸、胸腹主動脈瘤修復(fù)術(shù),開胸后在左鎖骨下動脈與降主動脈交匯處以無創(chuàng)血管夾阻斷降主動脈,造成腰段脊髓缺血。按照阻斷降主動脈時體溫和不同的阻斷時間,將大鼠分組。觀察各組大鼠延遲性癱瘓發(fā)生率、生存率、生存時間；觀察降主動脈阻斷時間、阻斷時大鼠的體溫對延遲性癱瘓的影響。 2.選擇在33.0±0.5攝氏度下阻斷降主動脈40min的大鼠與假手術(shù)組大鼠為研究對象。觀察解除降主動脈阻斷后6小時、30小時、48小時,大鼠腰膨大段脊髓Nissl染色、免疫熒光雙標、REAL-TIMEPCR檢測結(jié)果。 3.選擇在33.0±0.5攝氏度下阻斷降主動脈40min大鼠和假手術(shù)組大鼠為實驗對象。接受降主動脈阻斷的大鼠,按照是否使用小膠質(zhì)細胞抑制劑米諾環(huán)素及米諾環(huán)素的不同劑量,分為生理鹽水組、米諾環(huán)素30mg/kg組、米諾環(huán)素90mg/kg組。觀察各組大鼠術(shù)后各時間點BBB評分、大鼠的生存率與存活時間。 研究結(jié)果： 1.在接受降主動脈阻斷的各組大鼠中,在33.0±0.5攝氏度下阻斷降主動脈40min組大鼠,其延遲性癱瘓發(fā)生率較高(73%)；死亡率不隨延遲性癱瘓發(fā)生率升高而升高。在低溫下、常溫下均存在一個導(dǎo)致術(shù)后發(fā)生延遲性癱瘓的阻斷降主動脈時間窗。常溫下的時間窗為10-11.5min,低溫下的時間窗為18-40min。 2.大鼠在33.0±0.5攝氏度下接受降主動脈阻斷40min后,觀察腰膨大段脊髓病理改變。Nissl染色顯示,在解除阻斷后6小時,與假手術(shù)組比較,腰膨大段脊髓前角運動神經(jīng)元并無明顯減少,其差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；而在解除阻斷后30小時,出現(xiàn)運動神經(jīng)元數(shù)目減少,與假手術(shù)組其差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；在解除阻斷后48小時,運動神經(jīng)元數(shù)目進一步減少,可見大片運動神經(jīng)元壞死后的空泡,運動神經(jīng)元數(shù)目少于假手術(shù)組與解除阻斷后30小時組,其差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。免疫熒光雙標顯示,Ibal、IL-1β、IL-6,在解除阻斷后6小時,與假手術(shù)組比較,其灰度值差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；而在解除阻斷后30小時,與假手術(shù)組比較,其灰度值均升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；IL-1β與Ibal、IL-6與Ibal共表達。REAL-TIME PCR檢測顯示,在解除阻斷后30小時,IL-1β與IL-6mRNA的表達均高于假手術(shù)組,其差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。 3.在解除降主動脈阻斷后1小時,予以米諾環(huán)素90mg/kg組大鼠,其術(shù)后30、36、48、60、72小時下肢運動功能的BBB評分高于予以生理鹽水組大鼠,其差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；而予以米諾環(huán)素30mg/kg組大鼠,在術(shù)后30、36、48、60、72小時BBB評分與生理鹽水組差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。各組大鼠術(shù)后生存率差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。 實驗結(jié)論： 1.在33.0±0.5攝氏度下阻斷SD大鼠降主動脈40min,可以建立一個延遲性癱瘓發(fā)生率較高、實驗動物死亡率較低、生存時間較長、與臨床胸、胸腹主動脈瘤修復(fù)術(shù)較為接近的脊髓缺血后延遲性癱瘓動物模型。降主動脈阻斷時間與阻斷時溫度是決定大鼠術(shù)后是否會發(fā)生延遲性癱瘓的兩個重要因素。低溫與常溫下均存在一個導(dǎo)致延遲性癱瘓發(fā)生的時間窗,當降主動脈阻斷時間位于時間窗內(nèi)時,部分大鼠術(shù)后會發(fā)生延遲性癱瘓；阻斷時間越接近時間窗上限,延遲性癱瘓發(fā)生率越高；低溫可以提高這一時間窗的下限,擴大這一時間窗的窗口期。 2.復(fù)溫后小膠質(zhì)細胞逐步激活,激活的小膠質(zhì)細胞及其所釋放的炎性因子IL-1β、IL-6,可能是導(dǎo)致脊髓缺血后延遲性癱瘓發(fā)生的機制之一。 3.小膠質(zhì)細胞抑制劑米諾環(huán)素能在一定程度上避免脊髓缺血后延遲性癱瘓的發(fā)生。圖26幅,表7個,參考文獻173篇。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R651.2;R-332

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 金保純,王景德;脊髓大根動脈的解剖學(xué)觀察[J];白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1992年04期

2 楊少春,應(yīng)大君,李振強;腰膨大動脈的顯微外科解剖及其臨床意義[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2000年12期

3 童敏;賀亮;劉文亮;周勝華;;兩種大鼠心肌梗死模型的比較研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2011年11期

4 柴戩臣;;脊髓的血液供應(yīng)[J];河北醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1981年03期

5 吳晉室;王永珍;;肋間動脈的起始[J];解剖學(xué)雜志;1987年01期

6 孫其志,任先軍;根動脈的解剖特點與脊髓缺血的關(guān)系[J];中國脊柱脊髓雜志;2005年09期

7 徐強;代遠斌;孫善全;郭發(fā)才;;腰動脈的應(yīng)用解剖及臨床意義[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2011年05期

8 周慶;武忠;李慶國;王東進;;選擇性肋間動脈灌注在主動脈手術(shù)中的脊髓保護作用[J];心臟雜志;2009年05期

，

本文編號：2606426