【摘要】： 多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)是創(chuàng)傷及感染后最嚴重的并發(fā)癥，發(fā)病率高，往往由于來勢兇猛，病情發(fā)展急劇，難以被迄今的器官支持治療所遏制，，死亡率很高。腸道被認為是MODS的啟動器官，許多研究證實，嚴重創(chuàng)傷和感染早期，腸黏膜屏障功能減退、腸道微生態(tài)失衡以及腸黏膜免疫功能失調(diào)，大量炎癥介質(zhì)如TNF-α、IL-1等產(chǎn)生，引起全身炎癥反應(yīng)綜合征(system inflammatory reaction syndrome，SIRS)，導致器官功能障礙，最終發(fā)展為MODS。 腸黏膜免疫系統(tǒng)是一個完整的組織網(wǎng)絡(luò)，由Peyer淋巴結(jié)、腸黏膜固有層淋巴細胞、上皮間淋巴細胞(intraepithelial lymphocytes，IELs)組成。其主要的效應(yīng)細胞有CD4~+T細胞、CD8~+T細胞、B細胞、分化的漿細胞、巨噬細胞和抗原呈遞細胞等；主要的效應(yīng)分子是SIgA。黏膜免疫活動包括腸淋巴細胞活化、歸巢和SIgA分泌等。它的主要功能是參與機體的免疫防御，如參與機體的過敏反應(yīng)、超敏反應(yīng)和炎癥。近年來，越來越多的研究表明，腸黏膜損傷在MODS發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，但構(gòu)成腸黏膜屏障的重要組成部分——腸黏膜免疫系統(tǒng)在MODS中的作用卻不清楚。 腸淋巴細胞歸巢作為腸黏膜免疫系統(tǒng)重要免疫活動之一，它參與了腸黏膜急、慢性炎癥的發(fā)生；使腸黏膜有效地行使免疫監(jiān)視和免疫清除功能；是腸黏膜免疫系統(tǒng)與系統(tǒng)免疫系統(tǒng)溝通的重要橋梁。胃腸多肽、細胞黏附分子及一些細胞因子可能對淋巴細胞的遷移產(chǎn)生重要影響。然而MODS時腸黏膜淋巴細胞遷移的規(guī)律及其調(diào)控機制卻并不清楚。 此外，腸黏膜的神經(jīng)細胞與神經(jīng)介質(zhì)、內(nèi)分泌細胞與多肽分子、免疫細胞與細胞因子都是機體中數(shù)量最集中的部位。胃腸多肽是神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)中的重要調(diào)節(jié)因子。研究表明，腸黏膜固有層和Peyer淋巴結(jié)密集分布著腸血管活性多肽(vasoactive intestinal polypeptide，VIP)和生長抑素(somatostatin，SST)等肽能神經(jīng)纖維，這些肽能神經(jīng)纖維和上皮層及固有層的淋巴細胞，巨噬細胞等免疫細胞毗鄰，直接調(diào)節(jié)著腸黏膜免疫系統(tǒng)的功能。此外，特異性VIP受體廣泛存在于Peyer淋巴 重慶醫(yī)科大學博士學位論文 結(jié)高內(nèi)皮小靜脈(high endothelial venule，HEV)及淋巴管內(nèi)部和周圍，以及濾泡邊緣 的T細胞中，SST受體也在小鼠Peyer淋巴結(jié)和人腸豁膜固有層淋巴細胞中被發(fā)現(xiàn)， 這些受體可能對于淋巴細胞通過Peyer淋巴結(jié)或腸豁膜固有層的遷移具有重要的 調(diào)節(jié)作用。但VIP或SST對腸淋巴細胞遷移調(diào)節(jié)的研究不多，至于它們對MODS時 腸淋巴細胞調(diào)節(jié)的研究尚未見報道。 研究目的 l、探討生理情況下: 1) VIP或SST對大鼠腸淋巴細胞向系統(tǒng)免疫系統(tǒng)遷移的影響; 2) vIP或ssT對大鼠腸淋巴細胞歸巢至腸相關(guān)淋巴組織(gut一associated lymphoid tissue，GA叮)的調(diào)節(jié); 2、MODS時腸淋巴細胞再循環(huán)的改變，從豁膜免疫的角度探討MODS的病理生 理機制: 3、VIP或SST對MODS轉(zhuǎn)歸的影響; 4、MODS時VIP或SST對腸淋巴細胞歸巢的調(diào)節(jié)，從豁膜免疫的角度理解MODS 的病理生理機制; 5、viP或SST是否通過腸淋巴細胞上的相應(yīng)受體調(diào)節(jié)腸淋巴細胞的歸巢? 6、viP或SST對存在于小腸內(nèi)皮細胞上決定腸淋巴細胞歸巢到GALT的關(guān)鍵豁附 分子一豁膜地址素細胞豁附分子一1(mucosal“枷ssin eella曲esion moleeule一l， MAdCAM一l)的影響，以確定這兩種胃腸多膚調(diào)節(jié)腸淋巴細胞歸巢的分子機制。 研究方法 1、從大鼠腸系膜淋巴管插管引流淋巴液，收集腸淋巴細胞; 2、E花結(jié)分離法測定T細胞比例; 3、流式細胞儀檢測腸淋巴CD4+、CDS+淋巴細胞; 4、slCr標記腸淋巴細胞示蹤其在GALT的分布; 5、采用微型無創(chuàng)動脈夾夾閉腸系膜上動脈造成腸缺血再灌注損傷，誘導大鼠 MODS模型; 6、尸F(xiàn)岡F一a ELISA試劑盒測定腸淋巴液和外周血TNF一a水平; 重慶醫(yī)科大學博士學位論文 7、酶學分光光度法測定外周血D一乳酸水平; 8、賞試劑盒測定腸淋巴液和外周血內(nèi)毒素水平; 9、免疫組織化學法檢測腸淋巴細胞T、B細胞比例; 10、蘇木素一伊紅染色法觀察大鼠小腸、肝臟、腎臟和肺臟的組織學改變; 11、采用Rl斗PCR方法檢測腸淋巴細胞上SST和VIP受體的mRNA表達; 12、采用W七stem blot方法檢測小腸組織MAdCAM一1表達。 研究結(jié)果 1、生理情況下，由腸勃膜進入血循環(huán)的腸淋巴量、單位體積淋巴細胞數(shù)及單 位時間淋巴細胞數(shù)保持穩(wěn)定;由血循環(huán)遷移至GALT的腸淋巴細胞比例:Peyer 淋巴結(jié)為3.83%士1.87%，小腸彌散淋巴組織為1.07%士0.61%。 2、viP(o.2Pmol.g一’·h一‘、7 hour)顯著降低腸淋巴細胞由腸勃膜向血循環(huán)的遷移: 持續(xù)從靜脈輸入vIP后，5小時腸淋巴液中淋巴細胞總數(shù)為6.92士0.63、107個，顯 著低于對照組( 9.43士1.38/107個)，P0.05，降低26石%，而腸淋巴液量無顯著 改變，尸0.05，其中，T細胞降低20.6%，CDS+細胞降低1 1 .91%，CD4+細胞無顯 著改變;同時，vIP還抑制腸淋巴細胞由血循環(huán)進入GALT:Peyer淋巴結(jié)’‘cr-腸 淋巴細胞量系體內(nèi)總”c卜腸淋巴細胞量的1.83%士0.90%，顯著低于對照組3.85%
【圖文】：

材料和方法一、大鼠MODS模型的建立采用腸缺血再灌注方法制作大鼠MODs模型14一，](圖4一1一l)。雄性wistar大鼠，重250一300克，重慶醫(yī)科大學實驗動物中心提供。實驗前12小時禁食，自由喂水。術(shù)前從股靜脈輸入生理鹽水(0.3ml爪)，剖開大鼠腹腔，用微型無創(chuàng)動脈夾夾住大鼠腸系膜動脈根部45分鐘，松夾后再灌注6小時。

與對照1組比較，MODS大鼠小腸絨毛部分脫落，水腫明顯，大量炎癥細胞浸潤;肝實質(zhì)細胞空泡化，肝小葉結(jié)構(gòu)不清，匯管區(qū)大量炎癥細胞浸潤;腎小球結(jié)構(gòu)不清;肺泡間隔增厚，大量炎癥細胞浸潤(圖4一1一2)。45
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2003
【分類號】：R363

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 楊輝,唐承薇;腸血管活性多肽或生長抑素抑制大鼠腸CD8~+淋巴細胞歸巢[J];上海免疫學雜志;2002年03期

2 鄧群,黎沾良,陸連榮,梁延杰,孫小慶,于燕;生長抑素減輕大鼠急性壞死性胰腺炎的腸屏障損害[J];中華普通外科雜志;2000年12期

3 姚詠明;盛志勇;吳葉;于燕;陸連榮;;大鼠急性腸缺血后血漿D-乳酸的變化及其與腸粘膜損害的關(guān)系[J];中華整形燒傷外科雜志;1998年04期

4 楊輝,唐承薇;腸血管活性多肽或生長抑素對大鼠腸淋巴細胞在腸淋巴組織分布的影響[J];中華微生物學和免疫學雜志;2003年03期

本文編號：2599575