血管緊張素Ⅱ?qū)θ四殠чg充質(zhì)干細胞生物學特性的影響
發(fā)布時間:2018-07-06 16:52
本文選題:血管緊張素Ⅱ + 臍帶; 參考:《中華損傷與修復雜志(電子版)》2015年05期
【摘要】:目的體外觀察不同濃度血管緊張素Ⅱ(Ang-Ⅱ)對人臍帶間充質(zhì)干細胞(h UCMSC)凋亡、增殖和旁分泌的影響,篩選適宜濃度Ang-Ⅱ預處理h UCMSC。方法照筆者單位實驗室建立的方法,體外分離、培養(yǎng)并鑒定h UCMSC,取3~8代h UCMSC接種于培養(yǎng)板,將細胞按隨機數(shù)字表法分為4組(每組3個復孔):空白對照組、100 ng/m L Ang-Ⅱ組、500 ng/m L Ang-Ⅱ組及1000 ng/m L Ang-Ⅱ組,后3組分別于含有100ng/m L、500 ng/m L及1000 ng/m L Ang-Ⅱ的培養(yǎng)基、空白對照組使用不含有Ang-Ⅱ的培養(yǎng)基培養(yǎng),各組于培養(yǎng)24、48、72 h后分別于倒置顯微鏡鏡下觀察細胞形態(tài)和細胞融合的情況,吖啶橙/溴化乙錠(AO/EB)染色法檢測細胞凋亡情況,CCK-8法檢測細胞增殖活性,流式細胞儀檢測細胞周期(S期),酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測各組細胞上清液中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、成纖維細胞生長因子(b FGF)、肝細胞生長因子(HGF)的含量。結(jié)果培養(yǎng)24、48、72 h后,倒置顯微鏡下觀察各組細胞形態(tài)類似,均呈長梭形,少數(shù)細胞呈多角形,100 ng/m L Ang-Ⅱ組細胞的融合率分別為40%~45%、70%~80%、90%~95%,融合速度顯著增加。AO/EB結(jié)果顯示:僅100 ng/m L Ang-Ⅱ組與空白對照組未出現(xiàn)凋亡細胞或死亡細胞。CCK-8的結(jié)果同樣顯示100 ng/m L Ang-Ⅱ組細胞增殖速度顯著快于空白對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。流式細胞儀檢測結(jié)果顯示為100 ng/m L Ang-Ⅱ組所處的增殖周期(S)期細胞數(shù)量的比例顯著增加。ELISA檢測結(jié)果是100 ng/m L Ang-Ⅱ組細胞的VEGF、b FGF、HGF含量最高,與空白對照組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P均小于0.05)。結(jié)論 100 ng/m L Ang-Ⅱ具有抑制細胞凋亡,促進細胞增殖的功能,這可能與其使h UCMSC大量分泌VEGF、b FGF、HGF有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of different concentrations of angiotensin 鈪,
本文編號:2103484
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