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中間神經(jīng)元前體細(xì)胞株GE6在不同分化條件下小RNA的表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2018-03-15 06:27

  本文選題:小RNA 切入點(diǎn):小RNA芯片 出處:《生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志》2015年06期  論文類型:期刊論文


【摘要】:本研究通過(guò)分析小RNA(microRNAs)在大鼠大腦中間神經(jīng)元前體細(xì)胞株GE6體外分化中的表達(dá),篩選出在中間神經(jīng)元前體細(xì)胞系分化成熟過(guò)程中特異性表達(dá)的小RNA,并預(yù)測(cè)分析其可能在此過(guò)程中的功能。實(shí)驗(yàn)中,將GE6在三種不同條件下培養(yǎng),即:不加入任何其他生長(zhǎng)因子,正常分化培養(yǎng)4天的GE6(Ge6_4d);加入骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP2)后分化培養(yǎng)4天的GE6(Ge6_bmp2);以及加入音猥因子(SHH)后分化培養(yǎng)4天的GE6(Ge6_shh)。設(shè)陰性對(duì)照組為未分化的GE6(Ge6_u)。四組GE6細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞免疫熒光染色、qRT-PCR以及小RNA芯片檢測(cè)分析。通過(guò)四組細(xì)胞的兩兩比較、篩選及分析發(fā)現(xiàn),多種小RNA在GE6細(xì)胞的分化過(guò)程中含量有明顯變化。miR-710、miR-290-5p和miR-3473等在加入分泌因子BMP2的GE6細(xì)胞中含量顯著上調(diào)。這些小RNA可能對(duì)大鼠中間神經(jīng)元分化起到重要的調(diào)控作用。
[Abstract]:The purpose of this study was to investigate the expression of microRNAs in the differentiation of rat brain interneuron precursor cell line GE6 in vitro. Small RNAs specifically expressed during the differentiation and maturation of intermediate neuron precursor cell lines were screened and their functions were predicted and analyzed. In the experiment, GE6 was cultured under three different conditions, namely, no addition of any other growth factors, GE6Ge 6d after normal differentiation culture; GE6Ge 6bmp2T after adding bone morphogenetic protein (BMP2) and GE6Ge 6bmp2C after differentiation culture; GE6Ge 6hhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhof differentiation culture 4 days after normal differentiation and culture. The negative control group was divided into undifferentiated GE6Ge 6UU cells. The GE6 cells of the four groups were immunized with cell immunity. The cells of the four groups were immunized with GE6Ge 6U cells. Fluorescence staining qRT-PCR and small RNA microarray analysis were used to compare the four groups of cells. Screening and analysis revealed, There were significant changes in the contents of several small RNA during the differentiation of GE6 cells. MiR-710 miR-290-5p and miR-3473 were significantly up-regulated in GE6 cells added with secretory factor BMP2. These small RNA may play an important role in regulating the differentiation of rat intermediate neurons.
【作者單位】: 四川大學(xué)華西第二醫(yī)院發(fā)育與干細(xì)胞研究所;中國(guó)科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30971633,31171045)
【分類號(hào)】:R338;Q78

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本文編號(hào):1614851

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