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大鼠腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞的體外優(yōu)化培養(yǎng)及鑒定

發(fā)布時間:2017-11-01 21:01

  本文關鍵詞:大鼠腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞的體外優(yōu)化培養(yǎng)及鑒定


  更多相關文章: 星形膠質(zhì)細胞 大腦皮質(zhì) 細胞培養(yǎng) 大鼠


【摘要】:目的旨在獲得高純度的星形膠質(zhì)細胞,并對不同培養(yǎng)時期的細胞進行鑒定,為進一步研究奠定基礎。方法常規(guī)分離新生SD大鼠大腦皮質(zhì)并制備單細胞懸液,采用差速黏附加搖床震蕩法對所獲得的細胞進行純化。倒置相差顯微鏡及HE染色觀察細胞形態(tài),GFAP免疫熒光對獲得細胞進行鑒定。結(jié)果原代培養(yǎng)的皮質(zhì)細胞從3d開始迅速增殖,9~12d即可鋪滿瓶底,此時細胞呈明顯的分層生長,星形膠質(zhì)細胞位于底層,形態(tài)多樣,陽性率為(67.2±7.1)%;經(jīng)過1次傳代后,GFAP陽性率有所提升(84.0±6.0)%,但不能完全去除小膠質(zhì)細胞及少突膠質(zhì)細胞,細胞仍呈分層生長;至第3次傳代后,獲得大量幾乎為單一種類的星形膠質(zhì)細胞,其胞體較大、突起較短粗,一般2~3個,胞核圓形或橢圓形,常偏于一側(cè),GFAP染色呈強陽性,陽性率可達(97.6±2.4)%。結(jié)論通過差速黏附與搖床震蕩相結(jié)合的方法,獲得了高純度且生長狀態(tài)良好的星形膠質(zhì)細胞。
【作者單位】: 西安交通大學醫(yī)學部人體解剖與組織胚胎學系;西安交通大學醫(yī)學部神經(jīng)生物學研究所;
【關鍵詞】星形膠質(zhì)細胞 大腦皮質(zhì) 細胞培養(yǎng) 大鼠
【基金】:陜西省自然科學基金資助項目(No.2012JQ4011,2014JM4096) 中央高;究蒲袠I(yè)務費專項資金資助項目(No.xjj2012011)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 星形膠質(zhì)細胞是神經(jīng)組織內(nèi)數(shù)量最多、分布最廣的膠質(zhì)細胞,在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、突觸傳遞、神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等多種正常生理活動以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理機制中都起著十分重要的作用[1]。目前,用于實驗研究的星形膠質(zhì)細胞在很大程度上來源于嚙齒類動物腦組織的原代培養(yǎng),其中最常

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