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上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化參與神經(jīng)母細(xì)胞瘤缺氧環(huán)境下發(fā)生轉(zhuǎn)移機(jī)制的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2025-03-15 03:34
  研究背景: 惡性實(shí)體腫瘤在生長過程中由于腫瘤細(xì)胞的快速生長,使得血管的生長呈現(xiàn)相對(duì)滯后性,因此腫瘤細(xì)胞本身多處于不同程度的缺氧狀態(tài)。神經(jīng)母細(xì)胞瘤早期出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,其轉(zhuǎn)移機(jī)制仍不明確。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)是癌細(xì)胞在缺氧微環(huán)境下發(fā)生轉(zhuǎn)移的主要途徑,但目前關(guān)于這一機(jī)制與神經(jīng)母細(xì)胞瘤的關(guān)系這方面研究較少。 目的: 探索上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化機(jī)制是否與缺氧環(huán)境下神經(jīng)母細(xì)胞瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移有關(guān),并明確其相關(guān)分子變化。 方法: 1)隨機(jī)選取非轉(zhuǎn)移性神經(jīng)母細(xì)胞瘤(Ⅰ期)、未化療的轉(zhuǎn)移性神經(jīng)母細(xì)胞瘤(Ⅲ-Ⅳ期)、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤各5例,將這三種實(shí)體腫瘤標(biāo)本的石蠟切片用免疫組化的方法檢測(cè)E-cadherin與N-cadherin的表達(dá)變化。 2)將人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株SK-N-SH置入缺氧培養(yǎng)箱(1%O2,94%N2,5%CO2),建立腫瘤缺氧微環(huán)境并觀察細(xì)胞形態(tài)、通過檢測(cè)Caspase3/7及CCK-8檢測(cè)凋亡與增殖等基本細(xì)胞生物學(xué)變化。 3)Transwell試驗(yàn)比較常氧與缺氧環(huán)境下腫瘤細(xì)胞的侵襲性變化 4)Real time-PCR及Western blot分別檢測(cè)常氧及缺氧環(huán)境下E...

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2b不同腫瘤中N-cadherin的表達(dá)(x400),依次為GN、NBstageI、metastaticNB

圖2b不同腫瘤中N-cadherin的表達(dá)(x400),依次為GN、NBstageI、metastaticNB

圖2b不同腫瘤中N-cadherin的表達(dá)(x400),依次為GN、NBstageI、metastaticNB免疫組化結(jié)果顯示,E-cadherin及N-cadherin在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中均有不同程度的表達(dá)。在轉(zhuǎn)移性神經(jīng)母細(xì)胞瘤的切片中顯示距離血管周圍較近的腫瘤細(xì)胞....


圖4cadherin結(jié)構(gòu)示意圖

圖4cadherin結(jié)構(gòu)示意圖

圖4cadherin結(jié)構(gòu)示意圖癌癥屬于上皮來源腫瘤,主要以E-cadherin的表達(dá)為主。當(dāng)E-cadherin表達(dá)下調(diào)時(shí),與細(xì)胞骨架粘連的穩(wěn)定性降低,使薪附分子的功能失活,失去接觸抑制功能,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞早期發(fā)生轉(zhuǎn)移。有文獻(xiàn)報(bào)道認(rèn)為E-cadherinF降的同時(shí)可以出現(xiàn)異位N....


圖5HIF-1a、HIF-2a的表達(dá)差異

圖5HIF-1a、HIF-2a的表達(dá)差異

人學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果1. realtimePCR檢測(cè)HIF-1a、HIF-2a的mRNA隨缺氧時(shí)間的延長,HIF-1a和HIF-2a的mRNA表達(dá)均逐漸增加,缺氧24h(P=0.049,0.024)及缺氧48h(P=0.019,0.04)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,....


圖6a常氧24h、48h、72h細(xì)胞形態(tài)(xlOO)

圖6a常氧24h、48h、72h細(xì)胞形態(tài)(xlOO)

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本文編號(hào):4035094

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