目的 第一部分：探討獲取高純度大鼠原代腦微血管周細胞的分離和培養(yǎng)方法,并對其鑒定。 第二部分：探討褪黑素在過氧化氫(H2O2)誘導的大鼠腦微血管周細胞損傷中的保護作用。 第三部分：探討褪黑素抑制H2O2誘導的大鼠腦微血管周細胞凋亡的保護機制。 方法 第一部分：選取10只3周齡Wistar大鼠,取大腦,去除白質,剪碎成大約1mm3大小,通過兩次酶消化、20%BSA離心和33%連續(xù)密度Percoll梯度離心獲得純度較高的大腦微血管片段,接種于35mm培養(yǎng)皿中,加入含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5%CO2細胞孵箱中培養(yǎng),2天后更換新鮮培養(yǎng)基；采用倒置顯微鏡觀察周細胞生長狀況及其形態(tài)；免疫細胞化學法檢測NG2、α-SMA、vWF及GFAP表達,鑒定分離的細胞及其純度；MTT法檢測繪制其增殖曲線。 第二部分：應用MTT試驗和臺盼藍拒染試驗檢測不同濃度H2O2處理后腦微血管周細胞的細胞活力；應用胞內反應性氧簇檢測試劑盒檢測褪黑素及抗化劑GSH對胞內活性氧聚集的影響；采用TUNEL法確定細胞死亡類型；檢測褪黑素及GSH對H202誘導大鼠腦微血管周細胞損傷的保護作用。 第三部分：檢測褪黑素及...

【文章頁數】：143 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 大鼠原代腦微血管周細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定
    材料與方法
    結果
    討論
    小結
第二部分 褪黑素抑制H₂O₂誘導的大鼠腦微血管周細胞凋亡
    材料與方法
    結果
    討論
    小結
第三部分 褪黑素抑制H₂O₂誘導的大鼠腦微血管周細胞凋亡機制的研究
    材料與方法
    結果
    討論
    小結
參考文獻
全文總結
英文縮寫詞表
文獻綜述 1
    參考文獻
文獻綜述 2
    參考文獻
實驗文章 1
實驗文章 2
實驗文章 3
實驗文章 4
個人簡歷及攻讀期成果
致謝
附件



本文編號：3759256