IL-1β和TNF-α對原代培養(yǎng)的腹側中腦神經(jīng)元鐵代謝的調控機制研究
發(fā)布時間:2021-08-17 19:16
帕金森。≒arkinson’s disease, PD)是一種常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,臨床表現(xiàn)主要有靜止性震顫、肌僵直和運動減少等癥狀。其主要病理學基礎為黑質(substantia nigra, SN)多巴胺(dopamine, DA)能神經(jīng)元的脫失以及繼發(fā)引起的紋狀體DA含量下降。迄今為止,PD的發(fā)病原因仍未完全明了,遺傳、環(huán)境、年齡因素導致的如神經(jīng)炎癥、鐵代謝異常、線粒體功能障礙、蛋白異常聚集等都被認為參加了PD的發(fā)病。神經(jīng)炎癥反應主要表現(xiàn)為小膠質細胞的激活和炎性因子如白細胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)和腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的大量釋放。尸檢結果和動物實驗證實在PD病人和動物模型的SN和紋狀體區(qū)域IL-1β和TNF-α的含量升高;將IL-1β和TNF-α直接注射至腦內可以引起DA能神經(jīng)元的凋亡,而阻斷IL-1β和TNF-α的受體可以緩解6-羥基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,...
【文章來源】:青島大學山東省
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
材料和方法
1. 腹側中腦神經(jīng)元的原代培養(yǎng)
2. 小膠質細胞的原代培養(yǎng)
3. 免疫熒光方法鑒定腹側中腦神經(jīng)元和小膠質細胞的純度
4. IL-1β和TNF-α處理后VM神經(jīng)元攝鐵和鐵轉出功能的檢測
5. IL-1β和TNF-α處理的VM神經(jīng)元DMT1+IRE, FPN1和IRP1蛋白的表達變化
6. IL-1β和TNF-α處理的VM神經(jīng)元DMTI+IRE和FPN1 mRNA的表達變化
7. IL-1β和TNF-α處理的VM神經(jīng)元Hepcidin mRNA水平的表達變化
8. 細胞內活性氧物質(reactive oxide species,ROS)的檢測
9 神經(jīng)元培養(yǎng)基中一氧化氮(nitric oxide,NO)的檢測
10. FAC,DFO和LPS處理后小膠質細胞釋放炎性因子含量的檢測
11. 統(tǒng)計學處理
結果
1. 免疫熒光技術鑒定原代培養(yǎng)的神經(jīng)元和小膠質細胞的純度
2. IL-1β和TNF-α對VM神經(jīng)元攝鐵和鐵轉出功能的影響
3. IL-1β和TNF-α對VM神經(jīng)元中DMT1+IRE和FPN1表達的影響
4. IL-1β和TNF-α對VM神經(jīng)元中鐵調節(jié)蛋白(IRP1)的表達變化
5. IL-1β和TNF-α對VM神經(jīng)元中ROS和NO生成的影響
6. ROS和NO對VM神經(jīng)元中IRP1蛋白表達的影響
7. 不同鐵狀態(tài)對小膠質細胞釋放IL-1β和TNF-α的影響
討論
結論
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
縮略詞表
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]高氧對脂多糖誘導N9小膠質細胞促炎癥作用的影響[J]. 蔣樸,徐穎,劉楊,黃雪竹,幸宇,鄧世雄. 細胞與分子免疫學雜志. 2012(03)
[2]MPTP誘導小鼠黑質區(qū)鐵攝取和DMT1表達增加[J]. 姜宏,錢忠明,謝俊霞. 生理學報. 2003(05)
本文編號:3348338
【文章來源】:青島大學山東省
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
材料和方法
1. 腹側中腦神經(jīng)元的原代培養(yǎng)
2. 小膠質細胞的原代培養(yǎng)
3. 免疫熒光方法鑒定腹側中腦神經(jīng)元和小膠質細胞的純度
4. IL-1β和TNF-α處理后VM神經(jīng)元攝鐵和鐵轉出功能的檢測
5. IL-1β和TNF-α處理的VM神經(jīng)元DMT1+IRE, FPN1和IRP1蛋白的表達變化
6. IL-1β和TNF-α處理的VM神經(jīng)元DMTI+IRE和FPN1 mRNA的表達變化
7. IL-1β和TNF-α處理的VM神經(jīng)元Hepcidin mRNA水平的表達變化
8. 細胞內活性氧物質(reactive oxide species,ROS)的檢測
9 神經(jīng)元培養(yǎng)基中一氧化氮(nitric oxide,NO)的檢測
10. FAC,DFO和LPS處理后小膠質細胞釋放炎性因子含量的檢測
11. 統(tǒng)計學處理
結果
1. 免疫熒光技術鑒定原代培養(yǎng)的神經(jīng)元和小膠質細胞的純度
2. IL-1β和TNF-α對VM神經(jīng)元攝鐵和鐵轉出功能的影響
3. IL-1β和TNF-α對VM神經(jīng)元中DMT1+IRE和FPN1表達的影響
4. IL-1β和TNF-α對VM神經(jīng)元中鐵調節(jié)蛋白(IRP1)的表達變化
5. IL-1β和TNF-α對VM神經(jīng)元中ROS和NO生成的影響
6. ROS和NO對VM神經(jīng)元中IRP1蛋白表達的影響
7. 不同鐵狀態(tài)對小膠質細胞釋放IL-1β和TNF-α的影響
討論
結論
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
縮略詞表
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]高氧對脂多糖誘導N9小膠質細胞促炎癥作用的影響[J]. 蔣樸,徐穎,劉楊,黃雪竹,幸宇,鄧世雄. 細胞與分子免疫學雜志. 2012(03)
[2]MPTP誘導小鼠黑質區(qū)鐵攝取和DMT1表達增加[J]. 姜宏,錢忠明,謝俊霞. 生理學報. 2003(05)
本文編號:3348338
本文鏈接:http://www.sikaile.net/yixuelunwen/shenjingyixue/3348338.html
最近更新
教材專著