發(fā)布時間：2021-08-17 17:24

　　【研究背景】膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（Glioblastoma,GBM）,是顱內(nèi)惡性膠質(zhì)瘤類型中最常見的,它是起源于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的腫瘤。雖然對于其發(fā)生發(fā)展以及治療模式的探討在世界范圍內(nèi)廣泛展開,但是目前治療效果令人沮喪,患者平均生存期不足2年。常規(guī)治療手段包括外科手術(shù)切除,聯(lián)合放射治療以及化學(xué)藥物治療,但是由于膠質(zhì)瘤彌漫性生長,與正常腦組織邊界不清晰,放化療耐藥及復(fù)發(fā)等問題而帶來比較差的預(yù)后,因此尋找新的治療靶點如抗腫瘤血管生成是目前重要的研究方向。本課題組前期研究已經(jīng)證實EFEMP1（epidermal growth factor-containing fibulin-like extracellular matrix protein 1,EFEMP1）源性腫瘤抑制蛋白ZR30對U251,U87等膠質(zhì)瘤細(xì)胞系在體內(nèi)外都有著良好的抑制效果。本研究把人源原代細(xì)胞系以及抗血管生成為切入點展開深入研究。【研究目的】研究ZR30在膠質(zhì)瘤中的抗血管生成作用,探討ZR30對人源膠質(zhì)瘤原代培養(yǎng)細(xì)胞的體內(nèi)外血管生成的影響,闡明其可能的作用機制。【研究方法】應(yīng)用人源膠質(zhì)瘤原代培養(yǎng)細(xì)胞系51B,97B和98B繪制細(xì)胞... 

【文章來源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

剪碎至糊狀的新鮮膠質(zhì)瘤手術(shù)標(biāo)本(2)制備單細(xì)胞懸液：取上一步驟的組織漿狀物，加入0.25%胰酶，置于37℃培養(yǎng)

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文12圖2-2使用70μm細(xì)胞過濾器過濾中的細(xì)胞懸液(3)去除紅細(xì)胞：從4℃冰箱取出無菌的紅細(xì)胞裂解液(Tris-氯化銨)，與單細(xì)胞懸液體積1:5的比例相混合，輕輕吹打混勻，靜置5min(見圖2-3)，400g低速離心后去掉上清，在加入含10%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基重懸得去除紅細(xì)胞的單細(xì)胞懸液。圖2-3靜置后的細(xì)胞懸液(4)培養(yǎng)和凍存：將已經(jīng)去除紅細(xì)胞的單細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿上，48h后更換培養(yǎng)基，觀察細(xì)胞的生長情況和生長密度，適當(dāng)時候傳代培養(yǎng)。膠質(zhì)瘤細(xì)胞的形態(tài)為上皮細(xì)胞樣，貼壁生長。傳至5代左右，即細(xì)胞能穩(wěn)定傳代以后，加胰酶消化制成單細(xì)

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文12圖2-2使用70μm細(xì)胞過濾器過濾中的細(xì)胞懸液(3)去除紅細(xì)胞：從4℃冰箱取出無菌的紅細(xì)胞裂解液(Tris-氯化銨)，與單細(xì)胞懸液體積1:5的比例相混合，輕輕吹打混勻，靜置5min(見圖2-3)，400g低速離心后去掉上清，在加入含10%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基重懸得去除紅細(xì)胞的單細(xì)胞懸液。圖2-3靜置后的細(xì)胞懸液(4)培養(yǎng)和凍存：將已經(jīng)去除紅細(xì)胞的單細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿上，48h后更換培養(yǎng)基，觀察細(xì)胞的生長情況和生長密度，適當(dāng)時候傳代培養(yǎng)。膠質(zhì)瘤細(xì)胞的形態(tài)為上皮細(xì)胞樣，貼壁生長。傳至5代左右，即細(xì)胞能穩(wěn)定傳代以后，加胰酶消化制成單細(xì)


本文編號：3348180