目的:膠質(zhì)母細胞瘤是成人最常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤,惡性程度高,預(yù)后差。近年來研究發(fā)現(xiàn)炎癥微環(huán)境與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),在膠質(zhì)母細胞瘤中,炎癥微環(huán)境中TNF-α與膠質(zhì)母細胞瘤的臨床進程和侵襲性密切相關(guān)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)肺腫瘤炎癥微環(huán)境中巨噬細胞分泌TNF-α上調(diào)SOD-2而促進腫瘤進展。錳超氧化物歧化酶（SOD-2）是氧化應(yīng)激過程中的重要部分,在不同腫瘤中發(fā)揮著的癌基因或抑癌基因作用,介導(dǎo)腫瘤的進展。SOD-2對膠質(zhì)母細胞瘤遷移、侵襲的作用及機制研究未見報道,腫瘤微環(huán)境中TNF-α是否參與調(diào)控SOD-2的表達尚不清楚。本研究采用人膠質(zhì)母細胞瘤標(biāo)本,探討SOD-2在膠質(zhì)母細胞瘤的表達情況及對腫瘤進展的影響;體外培養(yǎng)膠質(zhì)母細胞瘤細胞以及人單核-巨噬細胞THP-1細胞,探討巨噬細胞分泌TNF-α對腫瘤細胞SOD-2表達的影響,旨在揭示腫瘤炎癥微環(huán)境中氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白對膠質(zhì)瘤進展的影響,為膠質(zhì)瘤的生物靶向治療提供新的理論依據(jù)。方法:1. 采用癌癥基因圖譜庫TCGA（TCGA The Cancer Genome Atlas）,分析了膠質(zhì)母細胞瘤組織中SOD-2在m RNA水平的表達情況,以及... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人類膠質(zhì)母細胞瘤組織標(biāo)本SOD-2和TNF-α表達及CD68+巨噬細胞浸潤情況

27圖2SOD-2對腫瘤細胞U87、U251細胞遷移和侵襲能力的影響Fig.2EffectofSOD-2onmigrationandinvasioninU87andU251cells.U87/U251cellsweretransfectedwithSOD-2siRNAorcontrolsiRNA.ThecellproliferationinbothcellsweremeasuredbyCCK8assay(A),andcloneformationassay(B,C),(twoexperiments,P>0.05,comparedtocontrol).ThemigrationabilityofU87/U251cellstransfectedwithSOD-2siRNAwasmeasuredbywoundhealingassay(D,E)andtranswellmigrationassay(F,G).TheinvasionabilityofU87/U251cellswasmeasuredbytranswellinvasionassay(H,I).TheexpressionofSOD-2,MMP-9,Cyclind-1,SurvivinandTFAMwasmeasuredbyWesternblot(J,K),(fourexperiments,*P<0.05,comparedtocontrol).Datawasshownasmean±SD.3抑制SOD-2表達對膠質(zhì)母細胞瘤中線粒體功能、糖酵解水平、SOD-2活性、H2O2含量的影響JI

31圖4TNF-α刺激對U87和U251細胞系中SOD-2表達及遷移、侵襲的影響Fig.4TNF-αregulatesmigrationandinvasioninU87andU251cellsthroughSOD-2expression.After24hofTNF-αtreatment,theexpressionofSOD-2inU87/U251cellstransfectedwithSOD-2siRNAwasdetectedbyWesternblot(A,B).ThemigrationabilityinbothcellsuponTNF-αtreatmentwasmeasuredbywoundhealingassay(C,D)andtranswellmigrationassay(E,F).TheinvasionabilityofU87/U251cellswasmeasuredbytranswellinvasionassay(G,H).Cellnumberwasdeterminedbycountingthepositivecellsnumberinhigherfieldanddatawasshownasmean±SD(fourexperiments,*P<0.05,*vsControl;#P<0.05,#vscontrolcellstreatedwithTNF-α).5THP-1巨噬細胞分泌TNF-α上調(diào)U87、U251細胞系中SOD-2的表達我們體外培養(yǎng)人單核細胞THP-1細胞，先采用PMA在體外刺激THP-1細胞，來獲得M0型巨噬細胞，然后采用LPS將THP-1細胞誘導(dǎo)分化為M1型巨噬細胞（Fig.5A），進而取得M0型和M1型巨噬細胞的上清，將其制成條件培養(yǎng)基，刺激U87和U251細胞，Westernblot結(jié)果顯示，與對照組相比，M0型和M1型巨噬細胞上清上調(diào)SOD-2表達，其中M1型巨噬細胞上清誘導(dǎo)U87/U251細胞SOD-2表達高于M0型巨噬細胞上清（Fig.5B，C）。M1型巨噬細胞上清加入TNF-α的中和抗體


本文編號：3104528