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腺苷預處理星形膠質(zhì)細胞氧糖剝奪復氧糖后CX3CL1、GLT-1表達的變化

發(fā)布時間:2020-11-01 11:46
   目的探討在缺氧復氧情況下腺苷預處理誘導星形膠質(zhì)細胞谷氨酸轉(zhuǎn)運體蛋白(GLT-1)和趨化因子(CX3CL1)的表達變化。方法原代培養(yǎng)的大鼠星形膠質(zhì)細胞分為正常組、模型組和腺苷預處理組。模型組:細胞接受5 h氧糖剝奪/復氧糖24 h處理;腺苷預處理組:細胞在氧糖剝奪前24 h加入100μmol/L腺苷后接受5 h氧糖剝奪/復氧糖24 h。在5 h氧糖剝奪/復氧糖24 h后觀察各組的細胞形態(tài)、MTT法檢測各組細胞活力,ELISA檢測各組CX3CL1的相對表達情況,免疫熒光法及Western印跡法檢測各組GLT-1的相對表達情況。結(jié)果①正常組、模型組和腺苷預處理組在氧糖剝奪5 h復氧糖24 h后細胞活力(OD值)分別是(0.763±0.065),(0.217±0.052)和(0.404±0.013),腺苷可以減少缺氧復氧引起的損傷(P0.05)。②與正常組相比,星形膠質(zhì)細胞在缺氧復氧后,其釋放的趨化因子CX3CL1明顯升高(P0.05),GLT-1的表達明顯降低(P0.05)。與模型組相比,腺苷預處理組可明顯降低缺氧復氧組CX3CL1的釋放(P0.05),以及增加缺氧復氧GLT-1的表達水平(P0.05)。結(jié)論腺苷預處理可使氧糖剝奪/復氧糖后CX3CL1的釋放減少,GLT-1表達量升高,從而增強腦對缺血再灌注損傷的耐受。
【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 實驗分組和OGD模型的建立[3]
    1.3 星形膠質(zhì)細胞形態(tài)學觀察
    1.4 細胞活性檢測
    1.5 ELISA檢測CX3CL1表達
    1.6 免疫熒光測GLT-1的表達[4]
    1.7 Western印跡測GLT-1表達量
    1.8 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 星形膠質(zhì)細胞的原代培養(yǎng)及鑒定結(jié)果
    2.2 各組星形膠質(zhì)細胞形態(tài)觀察及活力檢測結(jié)果
    2.3 MTT
    2.4糖氧剝奪復糖氧24 h后細胞培養(yǎng)液中CX3CL1濃度
    2.5 GLT-1免疫熒光結(jié)果
    2.6 Western印跡檢測氧糖剝奪/復糖后GLT-1的表達
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