背景:心肺復(fù)蘇成功后神經(jīng)系統(tǒng)功能完好的患者僅占1.4%,大多數(shù)患者死于心肺復(fù)蘇后全腦缺血缺氧性神經(jīng)功能損傷。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)程缺血處理對心、腦、腎等眾多器官的缺血/再灌注損傷具有保護(hù)作用,對心肺復(fù)蘇后的神經(jīng)功能恢復(fù)亦有促進(jìn)作用。遠(yuǎn)程缺血處理的方式主要有遠(yuǎn)程缺血前處理、遠(yuǎn)程缺血中處理和遠(yuǎn)程缺血后處理。這三種方式遠(yuǎn)程缺血處理在心肺復(fù)蘇后的神經(jīng)功能保護(hù)效果是否有差異,以及其具體保護(hù)機(jī)制尚不清楚。神經(jīng)元細(xì)胞大量凋亡是心肺復(fù)蘇后神經(jīng)功能損傷的主要原因,減少神經(jīng)元細(xì)胞凋亡是降低心肺復(fù)蘇后神經(jīng)功能損傷的重要措施。而線粒體膜通透性轉(zhuǎn)化孔通道(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)開放程度的調(diào)節(jié)在神經(jīng)元細(xì)胞凋亡途徑中起著核心作用。本研究觀察三種方式遠(yuǎn)程缺血處理對心肺復(fù)蘇大鼠的腦保護(hù)作用,及其對大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡和海馬神經(jīng)元細(xì)胞mPTP開放程度的影響,研究可能的保護(hù)機(jī)制。第一部分三種方式遠(yuǎn)程缺血處理對心肺復(fù)蘇大鼠腦保護(hù)效果比較目的:觀察不同方式遠(yuǎn)程缺血處理對心肺復(fù)蘇大鼠心肺復(fù)蘇成功率、生存率及復(fù)蘇后各時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能缺損評分(neurological deficit scores,NDS)的影響。方法:根據(jù)改良Utstein模式建立大鼠窒息法心臟驟停-復(fù)蘇模型。SD大鼠,75只,隨機(jī)分為空白對照組、未處理組、遠(yuǎn)程缺血前處理組、遠(yuǎn)程缺血中處理組和遠(yuǎn)程缺血后處理組(n =15)。阻斷/松開左側(cè)股動(dòng)脈完成遠(yuǎn)程缺血處理。觀察各組大鼠心肺復(fù)蘇成功率、生存率及復(fù)蘇后NDS評分。結(jié)果:遠(yuǎn)程缺血前處理組NDS評分在心肺復(fù)蘇后48h、72h較未處理組、中處理組顯著提高(P0.01)。遠(yuǎn)程缺血后處理組NDS評分在心肺復(fù)蘇后48h、72h較未處理組、中處理組顯著提高(P0.01)。遠(yuǎn)程缺血中處理組NDS評分在心肺復(fù)蘇后72h較未處理組輕度提高(P0.05)。結(jié)論:遠(yuǎn)程缺血前處理、遠(yuǎn)程缺血后處理可顯著提高大鼠心肺復(fù)蘇后NDS評分,其神經(jīng)功能保護(hù)效果優(yōu)于遠(yuǎn)程缺血中處理。第二部分遠(yuǎn)程缺血處理對心肺復(fù)蘇大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡及mPTP的影響目的:觀察不同方式遠(yuǎn)程缺血處理對心肺復(fù)蘇大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡以及海馬神經(jīng)元細(xì)胞mPTP開放程度的影響,研究遠(yuǎn)程缺血處理腦保護(hù)的機(jī)制。方法:根據(jù)改良Utstein模式建立大鼠窒息法心臟驟停-復(fù)蘇模型。SD大鼠,75只,隨機(jī)分為空白對照組、未處理組、遠(yuǎn)程缺血前處理組、遠(yuǎn)程缺血中處理組和遠(yuǎn)程缺血后處理組(n =15)。阻斷/松開左側(cè)股動(dòng)脈完成遠(yuǎn)程缺血處理。心肺復(fù)蘇后72h,Western Blot法測定海馬凋亡蛋白bcl-2、Bax、caspase-3表達(dá)水平,末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記法(TUNEL)及流式細(xì)胞儀法測定海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率,流式細(xì)胞儀法測定海馬神經(jīng)元細(xì)胞mPTP開放程度,并測定海馬神經(jīng)元細(xì)胞線粒體內(nèi)外膜完整性。結(jié)果:遠(yuǎn)程缺血前處理組、遠(yuǎn)程缺血后處理組海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率較未處理組及遠(yuǎn)程缺血中處理組降低(P0.05)。遠(yuǎn)程缺血前處理組、遠(yuǎn)程缺血后處理組海馬神經(jīng)元細(xì)胞線粒體內(nèi)外膜完整性較未處理組及遠(yuǎn)程缺血中處理組增高(P0.05)。前處理組、遠(yuǎn)程缺血后處理組海馬神經(jīng)元細(xì)胞mPTP開放程度較未處理組、遠(yuǎn)程缺血中處理組顯著降低(P0.01)。結(jié)論:遠(yuǎn)程缺血前處理、遠(yuǎn)程缺血后處理的心肺復(fù)蘇后神經(jīng)功能保護(hù)機(jī)制與阻斷mPTP開放,減少海馬區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡相關(guān)。第三部分mPTP阻斷劑與遠(yuǎn)程缺血后處理對心肺復(fù)蘇大鼠腦保護(hù)效果比較及機(jī)制研究目的:比較mPTP阻斷劑環(huán)孢霉素A(CyclosporinA,CsA)、遠(yuǎn)程缺血后處理單獨(dú)或聯(lián)合使用對心肺復(fù)蘇大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用,并研究其機(jī)制。方法:建立大鼠窒息法心臟驟停-復(fù)蘇模型。SD大鼠,60只,隨機(jī)分為對照組、遠(yuǎn)程缺血后處理組、CsA組、聯(lián)合組(n=15)。遠(yuǎn)程缺血后處理組通過阻斷/松開左側(cè)股動(dòng)脈完成遠(yuǎn)程缺血處理;CsA組在心肺復(fù)蘇成功后予以單次劑量的CsA靜注;聯(lián)合組則結(jié)合了上述兩項(xiàng)干預(yù)措施。測定大鼠心肺復(fù)蘇后NDS評分;心肺復(fù)蘇后72h通過HE染色及電鏡法觀察海馬區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞及線粒體形態(tài)學(xué)變化;TUNEL及流式細(xì)胞儀法測定大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率;并測定各組大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞mPTP開放程度的變化。結(jié)果:遠(yuǎn)程缺血后處理組、CsA組、聯(lián)合組心肺復(fù)蘇后48h、72hNDS評分較對照組顯著提高(P0.01),聯(lián)合組心肺復(fù)蘇后72hNDS評分較CsA組提高(P0.05);遠(yuǎn)程缺血后處理組、CsA組、聯(lián)合組心肺復(fù)蘇后海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率較對照組顯著降低(P0.01),這三組中以聯(lián)合組海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率最低;HE染色以及電鏡線粒體顯微結(jié)構(gòu)觀察均顯示聯(lián)合組具有更好的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用;mPTP開放程度方面,遠(yuǎn)程缺血后處理組較CsA組開放程度顯著增高(P0.01),聯(lián)合組與CsA組相比無差異(P0.05)。結(jié)論:CsA聯(lián)合遠(yuǎn)程缺血后處理對心肺復(fù)蘇大鼠具有更好的神經(jīng)保護(hù)作用。抑制mPTP開放是遠(yuǎn)程缺血后處理發(fā)揮其心肺復(fù)蘇后神經(jīng)功能保護(hù)的機(jī)制之一,但不是唯一機(jī)制。第四部分液體輸注對心肺復(fù)蘇大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的影響目的:前期造模實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),大鼠心肺復(fù)蘇后存在低血壓期。本研究觀察不同類型液體輸注對大鼠心肺復(fù)蘇后血流動(dòng)力學(xué)及海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的影響。方法:建立大鼠窒息法心臟驟停-復(fù)蘇模型。SD大鼠,60只,隨機(jī)分為對照組、生理鹽水(NS)組、高滲鹽水(HS)組以及羥乙基淀粉(HES)組(n =15)。心肺復(fù)蘇期分別予以生理鹽水、高滲鹽水或羥乙基淀粉持續(xù)輸注。觀察不同組別大鼠心肺復(fù)蘇成功率、生存率及NDS評分;HE染色觀察大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)變化;Western Blot法檢測大鼠海馬凋亡相關(guān)蛋白bcl-2、Bax、caspase-3的表達(dá)水平;TUNEL及流式細(xì)胞儀法測定大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:HS組心肺復(fù)蘇后12、24、48、72小時(shí)NDS評分均較NS組、HES組增高(P0.05);HS組HE染色結(jié)果提示大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞排列稍顯紊亂,中等量變性的神經(jīng)元細(xì)胞,可見細(xì)胞輕中度水腫,較NS組及HES組改善;HS組bcl-2表達(dá)水平較NS組、HES組顯著增高(P0.01),Bax、caspase-3表達(dá)水平較NS組、HES組顯著降低(P0.01);HS組海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率較NS組及HES組下降(P0.05)。結(jié)論:心肺復(fù)蘇期高滲鹽水持續(xù)輸注可減少大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,改善心肺復(fù)蘇后NDS評分。
【學(xué)位單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R743.3
【部分圖文】：

缺血處理示遨圈

顯著增高（尸＜0．0１）；心肺復(fù)蘇后ｌ0ｍｉｎ，前處理組較對照組ＭＡＰ下降ＣＰ＜０．０５）；逡逑心肺復(fù)蘇后１５ｍｉｎ、２０ｍｉｎ、２５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ，未處理組、前處理組、中處理組、逡逑后處理組ＭＡＰ均較對照組降低（戶＜０．０５，表１－２，圖１－２）。逡逑１５逡逑

理較空白、前、后處理組降低（Ｐ＝０．００１，邋０．００９，邋０．０４７）；前處理組較未處理、逡逑中處理組增高（Ｐ邋＝０．００９，邋０．０１５）；中處理較空白、前處理組降低（／＞邋＝０．００１，逡逑０．０１５）；后處理組較空白及未處理組增高（Ｐ＝０．０２４，邋０．０４７，表２－１，圖２－１）。逡逑１．２邐Ｂａｘ結(jié)果逡逑空白組較未處理組、前中后處理組降低（Ｐ邋＝０．０００，邋０．００６，邋０．０００，邋０．００３）；逡逑未處理組較空白、前后處理組增高（戶＜０．０１）；前處理組較空白組X椄擼ǎ繡義希劍埃埃埃叮�，姐晞�(chuàng)砑爸寫磣榻檔停ɑВ跡埃埃保恢寫磣榻峽瞻鬃欏⑶昂蟠﹀義俠磣樵齦擼ǎ校跡埃埃保緩蟠磣榻峽瞻鬃樵齦擼ǎ校劍埃埃埃常�，姐晞�(chuàng)砑爸寫﹀義俠磣榻檔停ɑВ跡埃埃保恚玻�，哇E玻保ｅ義希保沖危茫幔螅穡幔螅澹沖褰峁義峽瞻鬃榻現(xiàn)寫磣榻檔停ǎ校

本文編號(hào)：2822665