【摘要】：目的:觀察周細胞在癲癇持續(xù)狀態(tài)后血腦屏障開放中的異常變化,探討周細胞對癲癇持續(xù)狀態(tài)后急性期血腦屏障開放和慢性期血腦屏障修復中的作用,為癲癇持續(xù)狀態(tài)的臨床治療和科學研究提供新的思路和方法。研究方法:制備氯化鋰-匹魯卡品致癇大鼠模型,采用伊文思藍法和干濕重法評估癲癇持續(xù)狀態(tài)后2h、24h、3d、7d、14d和21d海馬組織中血腦屏障破壞程度;電鏡觀察發(fā)作后不同時期周細胞及血腦屏障的超微結構改變,Western Blot法檢測發(fā)作后不同時期海馬組織中周細胞標記蛋白pdgfrβ的表達量,免疫組織化學以及免疫熒光法半定量分析Pdgfrβ在海馬中的分布和表達情況,觀察周細胞在癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作急慢性期的破壞和恢復中的作用。結果:(1)癲癇持續(xù)狀態(tài)后血腦屏障破壞,滲透性增強,其中發(fā)作后24h破壞最嚴重,發(fā)作3d及以后逐漸恢復正常;(2)透射電鏡結果表明SE發(fā)作后腦微血管周細胞及其連接基膜超微結構均發(fā)生改變;(3)Western blot和免疫熒光的結果提示SE發(fā)作后24hPdgfrβ的表達水平明顯高于對照組(P0.05),3d及以后逐漸趨于平穩(wěn);(4)免疫熒光檢測結果提示Pdgfrβ沿著微血管壁分布,SE發(fā)作后24hPdgfrβ表達和分布水平明顯高于對照組(P0.05),3d及以后逐漸趨于平穩(wěn)。結論:癲癇持續(xù)狀態(tài)后24h血腦屏障破壞最嚴重,3d及以后又逐漸恢復正常,周細胞在其急性期的破壞機制和亞急性期恢復機制中起到了重要的作用,可為臨床治療SE早期腦破壞提供重要作用。
【圖文】：

匹魯卡品前 30 分鐘腹腔注射東莨菪堿(應。重程度采用修正 Racine 六級評價標準進;、面肌痙攣如眨眼、動須及節(jié)律性咀嚼攣表現為點頭和 /或甩尾;攣;攣伴站立;失去平衡，跌倒。搐狀態(tài)并且抽搐至少 30 分鐘定義為癲癇癇持續(xù)狀態(tài)的動物模型。抽搐發(fā)作持續(xù)若無發(fā)作或發(fā)作未達到Ⅳ級，則每隔 30再觀察 30min，最多可追加 3 次，若追加造模失敗。正常對照組等量生理鹽水腹

中國醫(yī)科大學碩士學位論文醛經腹腔麻醉，待麻醉后將大鼠固定在腦鼠顱骨頂部局部消毒后剪開 3-4cm 皮膚，膜鈍性分離，仔細清除多余的皮下組織和固定到前囟位置，記錄此時定位儀上各軸 0.5 mm 的小手鉆，分別在大鼠前囟門兩個記錄電極孔，插入自制銀針 3-5cm，銹鋼電極夾夾住銀針，參考電極夾住大鼠前，先進性 10 分鐘腦電圖記錄，腹腔注間腦電圖 30 分鐘。腦電監(jiān)測后的大鼠經，所有操作均在冰上快速完成，，分離大鼠待統(tǒng)一進行 Western Blot 檢測。
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R742.1

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本文編號：2698747