【摘要】：[目的]觀察脈沖射頻(Pulsed Radiofrequency,PRF)作用于坐骨神經(jīng)分支選擇損傷模型(SparedNerve Injury Model,SNI)大鼠坐骨神經(jīng)分支結(jié)扎處引起的疼痛行為改變,檢測背根神經(jīng)節(jié)NF-κB、TNF-α、IL-6表達(dá)的變化,進(jìn)而探討脈沖射頻治療神經(jīng)病理性疼痛的神經(jīng)炎性反應(yīng)相關(guān)機(jī)制。[方法]1實驗對象選取200～250g純種雄性SD大鼠18只,隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(Sham組)、坐骨神經(jīng)分支損傷組(SNI組)、坐骨神經(jīng)分支損傷+脈沖射頻組(SNI+PRF組),每組6只。2造模與取材建立坐骨神經(jīng)分支選擇損傷模型(SNI):將一側(cè)坐骨神經(jīng)干的脛神經(jīng)和腓總神經(jīng)分支切斷并結(jié)扎,保留腓腸神經(jīng)分支。Sham組僅暴露但不損傷坐骨神經(jīng)及其分支。SNI+PRF組于造模第7天對大鼠脛神經(jīng)+腓總神經(jīng)結(jié)扎近端行脈沖射頻治療,脈沖射頻設(shè)定脈沖頻率2Hz,脈寬20ms,溫度42℃,治療持續(xù)時間2min。Sham組和SNI組不予治療,三組均于術(shù)后8天疼痛行為學(xué)測試結(jié)束后進(jìn)行背根神經(jīng)節(jié)(Dorsal Root Ganglion,DRG)取材。3檢測指標(biāo)術(shù)前2小時及術(shù)后1、4、7、8天檢測并記錄各組大鼠疼痛行為變化,包括對 50%機(jī)械刺激縮足反射閾值(Paw Mechanical Withdrawal Threshold,PMWT)和冷板累積抬足時間進(jìn)行測定,以反映大鼠機(jī)械性痛覺過敏和冷觸誘發(fā)痛變化;術(shù)后8天行為學(xué)檢測結(jié)束后每組隨機(jī)抽取4只對大鼠L4、L5背根神經(jīng)節(jié)進(jìn)行取材,行Western Blotting法檢測背根神經(jīng)節(jié)NF-1κB、TNF-α和IL-6的表達(dá)。[結(jié)果]1.50%機(jī)械刺激縮足反射閾值(PMWT):術(shù)前各組大鼠左后足PMWT比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后1、4、7天,與Sham組相比,SNI組、SNI+PRF組PMWT均逐漸降低,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);SNI組與SNI+PRF組PMWT相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后8天(PRF治療后24小時),SNI+PRF組PMWT較SNI組明顯上升(P0.05);SNI組PMWT較Sham組進(jìn)一步下降(P0.05)。2.冷板累積抬足時間:術(shù)前各組大鼠左后足累積抬足時間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后1、4、7天,與Sham組對比,SNI組、SNI+PRF組累積抬足時間顯著延長(P0.05),且呈逐漸上升趨勢;SNI組與SNI+PRF組累積抬足時間相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后8天(PRF治療后24小時),SNI+PRF組大鼠累積抬足時間較SNI組縮短,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);SNI組累積抬足時間相較Sham組,仍維持在較高水平,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.Western Blotting法檢測結(jié)果:術(shù)后8天,SNI組大鼠背根神經(jīng)節(jié)中NF-1κB、TNF-α、IL-6的表達(dá)水平明顯高于各組(P0.05)。與Sham組比較,SNI+PRF組TNF-α、IL-6的表達(dá)增加(P0.05),而NF-1κB的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。與SNI 組比較,SNI+PRF 組 NF-κB、TNF-α、IL-6 的表達(dá)均減少(P0.05)。[結(jié)論]SNI大鼠神經(jīng)病理性疼痛行為改變可能與背角神經(jīng)節(jié)NF-1κB的激活及致炎因子TNF-α、IL-6的釋放相關(guān),脈沖射頻24小時即可明顯緩解大鼠疼痛,其機(jī)制與神經(jīng)炎性反應(yīng)調(diào)節(jié)NF-1κB、TNF-α、IL-6的表達(dá)有關(guān)。
【圖文】：

圖２－１實驗總體流程圖逡逑Ｆｉｇ．邋２－１邋Ｏｖｅｒａｌ邋Ｆｌｏｗ邋Ｃｈａｒｔ逡逑

暴露坐骨神經(jīng)及其３個分支：脛神經(jīng)、腓總神經(jīng)和腓腸神經(jīng)。用玻璃分針小心逡逑分離脛神經(jīng)＋腓總神經(jīng)以及腓腸神經(jīng)，隨后用４號絲線將脛神經(jīng)＋腓總神經(jīng)結(jié)扎，逡逑用眼科剪在結(jié)扎線的遠(yuǎn)端將神經(jīng)剪斷（見圖２－１），并剪去約４＿遠(yuǎn)端神經(jīng)斷端，逡逑此過程注意勿損傷腓腸神經(jīng)，以保留腓腸神經(jīng)完整性。依次縫合肌肉層和皮膚逡逑層，并消毒手術(shù)切口。逡逑ｊ邋Ｌ４邋；邋々逡逑ｆｒｖ－逡逑！／邐＇Ｌ５，．，；少逡逑；）邐／廣逡逑Ｉ邋Ｈ邋，土色＇：背根神經(jīng)節(jié)逡逑ｌ＼邋Ｕ邋／／逡逑＼邋＼邋ＩＩ邋／邋／逡逑＼邋＼邋Ｈ邋，／１邋Ｉ逡逑！邋／邋＼＞逡逑（邋＼逡逑＼邋％逡逑＼逡逑＞邐Ｘ．逡逑＼邋卜、、、、、、逡逑腓臉神經(jīng)逡逑腓總神＾邋■￣￣￣神經(jīng)逡逑圖２－２坐骨神經(jīng)損傷模型圖逡逑Ｆｉｇ．邋２－２邋Ｓｐａｒｅｄ邋Ｎｅｒｖｅ邋Ｉｎｊｕｒｙ邋Ｍｏｄｅｌ逡逑３不同實驗動物組的處理逡逑假手術(shù)組僅暴露但不損傷坐骨神經(jīng)及其分支，隨即縫合手術(shù)切口，且無后逡逑續(xù)千預(yù)。ＳＮＩ組造模成功后也無后續(xù)干預(yù)。ＳＮＩ＋ＰＲＰ組于造模第７天疼痛行為逡逑學(xué)測試結(jié)束后對大鼠脛神經(jīng)＋腓總神經(jīng)結(jié)扎近端行脈沖射頻治療，脈沖射頻參數(shù)逡逑２３逡逑
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R741

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2647008