【摘要】：目的:通過觀測腦出血患者腦脊液(CSF)中生化指標和miRNA表達變化,在蛋白水平和核酸水平層面篩選可用于腦出血疾病輔助診斷的CSF標志物,進而評估其臨床應用價值。方法:選取腦出血(ICH)疾病患者26例,依據格拉斯哥評分(GCS)將其分為輕度ICH組(13例)、重度ICH組(13例),同時選取22例同期排除腦部疾病的住院患者作為對照組。采集各組研究對象入院48h內CSF樣本3~5ml,按實驗目的和要求對原始樣本行前處理制備待試樣本。在蛋白水平層面:采用全自動生化分析儀和化學發(fā)光免疫分析儀檢測β_2微球蛋白(β_2-MG)、門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、乳酸(LAC)、乳酸脫氫酶(LD)、微量白蛋白(mAlb)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)和星形膠質源性蛋白(S100B)水平的表達變化,評估上述指標診斷腦出血疾病的價值;在核酸水平層面:以cel miRNA-39為外參,應用qRT-PCR方法檢測文獻報道的與中樞神經系統(tǒng)疾病相關的15個靶標miRNA,觀察各靶標miRNA在腦出血疾病中的表達變化、評估其診斷價值,進而應用生物信息學分析方法預測潛在與腦損傷相關的靶基因。結果:在蛋白水平層面:與對照組相比,輕度ICH組、重度ICH組CSF中LD、GLU、CL表達變化無統(tǒng)計學差異(P0.05);mAlb、PRO、清蛋白指數(shù)(QAlb,QAlb=CAlb/SAlb)水平在輕、重度ICH組中顯著升高(P0.05),但隨ICH損傷程度變化不大;而NSE、S100B、β_2-MG、AST、LAC水平在輕、重度ICH組中顯著升高(P0.05),并隨ICH損傷程度呈現(xiàn)增高趨勢�；谇捌陬A實驗結果,并結合相關文獻報道,選擇S100B、NSE作為下一步研究對象。對二者行ROC曲線分析,結果顯示NSE、S100B診斷ICH的曲線下面積、敏感度、特異度分別為0.931[95%CI:0.857~0.892]、80.8%、95.5%和0.795[95%CI:0.670~0.921]、76.9%、77.3%;兩者聯(lián)合檢測在特異度與單項檢測相當(73.8%)的前提下,可提高診斷ICH的AUC至0.965,敏感度至95.6%。進一步的研究顯示,NSE的水平與ICH患者出血量顯著相關(r=0.86;P0.05),S100B的水平與ICH患者出血量呈弱相關(r=0.49;P0.05);NSE、S100B與Qalb存在正相關關系(r分別為0.443、0.606)(P0.05),提示二指標與血腦屏障損傷相關;另外NSE、S100B表達水平與NIHSS評分均呈正相關(r分別為0.596、0.615)(P0.05),提示S100B、NSE蛋白可用于腦出血神經功能缺損評估,進一步對其診斷效能進行分析,結果顯示S100B、NSE鑒別低、高NIHSS評分組腦出血疾病的敏感度分別為78.9%、80.8%,特異度分別為73.3%、55.2%,二指標聯(lián)合檢測可顯著提高敏感度至95.9%(P0.05)。在核酸水平層面:ICH患者miR-124-3p、miR-146a-5p表達顯著上調,進而分析其在診斷ICH的效能,結果顯示:miR-124-3p、miR-146a-5p診斷ICH的AUC、敏感度、特異度分別為0.667[95%CI:0.512~0.822]、68.8%、81.8%和0.878[95%CI:0.776~0.844]、50.1%、86.4%,二者聯(lián)合可提高診斷ICH的敏感度至84.4%;進一步的生物信息學分析結果顯示:miR-124-3p可預測到91個靶基因,miR-146a-5p可預測到126個靶基因,其中包括SERP1、PDCD6、VEGFR-2,提示miR-124-3p、miR-146a-5p可能參與細胞凋亡、炎癥反應、血管內皮的損傷與修復過程。結論:1.腦脊液中NSE、S100B水平可用于腦出血實驗室輔助診斷,其表達變化可反映腦損傷嚴重程度;2.腦出血患者腦脊液中miR-124-3p、miR-146a-5p表達顯著上調,兩者聯(lián)合檢測可用于ICH的實驗室輔助診斷;3.miR-124-3p、miR-146a-5p可能參與腦損傷病理生理過程。
【圖文】：

監(jiān)測；臨床上常用的神經功能評分雖然簡捷、易行，但無法客觀反應病此，，腦出血疾病的早期診斷及客觀的病情評估成為臨床關注的焦點和熱傷標志物有可能是解決這一問題的關鍵，相對于全血、血漿或血清而言白標志物可更直接、客觀的反映腦損傷及腦損傷嚴重程度。研究，在蛋白水平層面，采用全自動生化分析儀和化學發(fā)光免疫分析儀檢（β2-MG）、門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、乳酸（LAC）、乳酸脫氫酶（白（mAlb）、神經元特異性烯醇化酶（NSE）、星形膠質源性蛋白（S100變化，評估上述指標在腦出血疾病中的診斷價值，旨在為腦出血的早期情評估遴選臨床檢驗診斷指標提供實驗室參考。一、材料與方法對象 基本資料取 2017 年 3 月至 2018 年 9 月期間在本院神經外科確診的的新發(fā) ICH 2例組（其中包括基底節(jié)出血 16 例）。平均年齡 56.35±13.90 歲，其中包括和 10 名女性患者，腦出血典型病例 CT 檢查結果見圖 1。

圖 2 CSF-NSE、S100B 單獨和聯(lián)合檢測的診斷腦出血的效能分析Figure 2 Efficacy analysis of CSF-NSE, S100B alone and combined detection fordiagnosis of ICH4. CSF-NSE、S100B 表達變化與腦出血量的相關性分析應用 Pearson 直線相關分析 CSF-NSE、S100B 水平的表達變化是否與腦出血量有聯(lián)，結果顯示，CSF-NSE 水平與 ICH 患者出血量顯著相關（r=0.86; P<0.01，圖 3A）CSF-S100B 水平與 ICH 患者出血量呈弱相關（r=0.49; P<0.05，圖 3B）。
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R743.34

【參考文獻】

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本文編號：2624135