【摘要】：目的:探討Rho激酶抑制劑對(duì)腦出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠腦保護(hù)的作用及其機(jī)制。方法:120只健康成年雄性Sprague-Dawlay(SD)大鼠隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(Sham)、腦出血組(ICH)、干預(yù)組。其中干預(yù)組再分為低劑量法舒地爾干預(yù)組(LD)和高劑量鹽酸法舒地爾干預(yù)組(HD)兩個(gè)亞組。腦出血組和干預(yù)組采用非抗凝自體血立體定向注射法建立腦出血?jiǎng)游锬Ｐ?假手術(shù)組僅用微量注射器刺入右側(cè)尾狀核。假手術(shù)組及腦出血組于造模完成后30min經(jīng)腹腔注射2ml生理鹽水此后每24小時(shí)給藥一次,干預(yù)組于造模完成后30min經(jīng)腹腔分別注射鹽酸法舒地爾l0mg/kg(LD)、30mg/kg(HD),此后每24小時(shí)給藥一次。分別于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)斷頭取腦,HE染色觀察血腫形成及血腫周?chē)M織炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況,并用干濕重法檢測(cè)腦組織含水量,采用ELISA法檢測(cè)腦組織IL-6、TNF-α水平,Western blot 法檢測(cè)血腫周?chē)M織 ROCK2、MYPT-1、P-MYPT-1、Bcl-2、Bax、AQP-4蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1.大鼠腦出血后12h、1d、3d血腫周?chē)M織ROCK2蛋白表達(dá)與假手術(shù)組相比明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。大鼠腦出血后12h、ld、3d、5d、7d腦組織含水量、IL-6、TNF-α相對(duì)含量明顯增高,與假手術(shù)組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。大鼠腦出血后12h、1d、3d、5d、7d血腫周?chē)M織Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表達(dá)與假手術(shù)組相比明顯增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.干預(yù)組12h、1d、3d血腫周?chē)M織ROCK2蛋白表達(dá)與ICH組相比明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。造模后12h高劑量鹽酸法舒地爾干預(yù)組(HD)血腫周?chē)M織ROCK2蛋白表達(dá)與低劑量鹽酸法舒地爾干預(yù)組(LD)相比明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。干預(yù)組之間造模后1d、3d血腫周?chē)M織ROCK2蛋白表達(dá)無(wú)明顯差異。3.腦出血后MYPT-1磷酸化水平與假手術(shù)組相比明顯增高并且隨著時(shí)間變化逐漸減少,干預(yù)組MYPT-1磷酸化水平與腦出血組相比明顯減少。并且高劑量鹽酸法舒地爾干預(yù)組(HD)作用更為明顯。4.干預(yù)組凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2表達(dá)與腦出血組相比明顯增加,Bax蛋白表達(dá)明顯減少。干預(yù)組AQP-4蛋白表達(dá)與腦出血組(12h)相比明顯減少。結(jié)論:鹽酸法舒地爾可通過(guò)減少血腫周?chē)X組織ROCK2的表達(dá)及抑制其功能來(lái)減輕ICH后腦水腫,抑制炎癥因子分泌及細(xì)胞凋亡來(lái)發(fā)揮神經(jīng)功能保護(hù)作用。
【圖文】：

腦出血后１２ｈ血腫周?chē)X組織ＲＯＣＫ－２蛋白表達(dá)開(kāi)始升高，并于丨、３天維逡逑持較高水平，，與假手術(shù)組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，腦出血后５ｄ、７ｄ血腫周?chē)义夏X組織ＲＯＣＫ－２蛋白與假手術(shù)組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見(jiàn)圖２邋）逡逑２１逡逑

邐ｉ邋＊邋Ｊ逡逑＾逡逑圖２．２．２：血腫周?chē)M織各時(shí)間點(diǎn)ＲＯＣＫ－２蛋白表達(dá)量，與假手術(shù)組相比，＊尸＜０．０５。逡逑２．３．３血腫周?chē)M織各時(shí)間點(diǎn)Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｇａｓｐａｓｅ－３蛋白逡逑表達(dá)逡逑腦出血組各時(shí)間點(diǎn)血腫周?chē)M織Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｃａｓｐａｓｅ－３表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)呈逡逑動(dòng)態(tài)變化，其中Ｂｃｌ－２于３ｄ達(dá)高峰。Ｂａｘ、Ｃａｓｐａｓｅ－３于出血后１２ｈ開(kāi)始增高，逡逑此后維持在較高水平。與假手術(shù)組相比較，腦出血后Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｃａｓｐａｓｅ－３表逡逑達(dá)水平明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜0．0５）（見(jiàn)圖３）。逡逑２．５－．邐＊逡逑ｂ邋ｂ邋ｂ邋ｂ邋２．０－邐＊邋＊邋工邋＊邋＊逡逑丁邐丁邋Ｉ逡逑Ｃａｓｐａｓｅ－３邐ｍｍｍ邋ｍｍｍ邐＾邋１邋ｇ邐廠＾邐［逡逑ＢＡＸ邐■丁一邋ｍｍｍ邋ｍｍｍ邋ｍｍｔｍ邐ｍ邋１邋ｒｉ＿邋－？￣逡逑邐邐邋ｍｍｍｍｍ逡逑．．．．．．－．．．．？－邐0５逡逑ｄ．邋ａｇＢａＳＫ＾ＳＢＳａｉＳ＾ＳＳｆｌＭａｉＢａＭＭＭ——．．

本文編號(hào)：2620184