【摘要】：目的從信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及細胞凋亡角度,研究亞低溫對大鼠腦缺血再灌注損傷(I/R)的腦保護作用及機制。方法 72只雄性健康SD大鼠,隨機分成假手術(shù)組(S組)、缺血再灌注組(IR組)、亞低溫組(M組),每組24只;三組缺血10 min后分別按再灌注12 h、24 h、48 h,再分為3個亞組,各亞組動物均為8只。大鼠腦缺血再灌注損傷模型制作采用改良四血管阻滯法,免疫組化SP法動態(tài)觀察各個時間點海馬CA1區(qū)caspase-3蛋白的變化;光鏡和電鏡分別觀察再灌注48 h亞組海馬CA1區(qū)神經(jīng)細胞形態(tài)和線粒體超微結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果 (1)大鼠腦缺血再灌注損傷后12 h海馬CA1區(qū)caspase-3即有明顯表達,24 h達高峰,48 h后仍有較高表達;(2)IR組和M組各時間點caspase-3表達水平比S組明顯升高(P0.05);24 h亞組線粒體超微結(jié)構(gòu)和神經(jīng)細胞形態(tài)受損嚴(yán)重;(3)M組各個時間點caspase-3表達水平較IR組明顯下降(P0.05或P0.01);24 h亞組線粒體超微結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元形態(tài)均有不同程度的改善。結(jié)論亞低溫對caspase-3依賴的線粒體凋亡通路有干預(yù)作用,通過維持線粒體膜穩(wěn)定,抑制釋放和激活caspase-3蛋白,保護線粒體的形態(tài)功能,從而減少神經(jīng)細胞凋亡的發(fā)生,發(fā)揮腦保護作用。
【圖文】：

圖1腦I/Ｒ后海馬caspase-3蛋白免疫組化結(jié)果(SP×400)Fig．1Expressionofcaspase-3athippocampusCA1regionafterI/Ｒ(SP×400)1A:Expressionofcaspase-3inS24hsubgroup1B:Expressionofcaspase-3inIＲ24hsubgroup1C:Expressionofcaspase-3inM24hsubgroup圖2腦I/Ｒ后24h海馬CA1區(qū)光鏡結(jié)果(H-E×400)Fig．2CellularmorphologyathippocampusCA1regionat24hoursafterI/Ｒunderthelightmicroscope(H-E×400)2A:S24hsubgroup2B:IＲ24hsubgroup2C:M24hsubgroup2．3透射電鏡觀察S組海馬CA1區(qū)的超微結(jié)構(gòu)基本正常:神經(jīng)細胞核大小形態(tài)正常，呈橢圓形，核膜光滑，可見清晰的核仁，胞質(zhì)內(nèi)可見大量正常的線粒體，胞質(zhì)密度均勻，內(nèi)可見大量排列密雜的嵴和基質(zhì)，見圖3A。IＲ組:神經(jīng)細胞破壞嚴(yán)重，染色質(zhì)聚集濃縮，核仁碎裂和邊移，核膜破壞，完整性和連續(xù)性中斷。胞質(zhì)排列紊亂，密度不均，線粒體水腫明顯，部分呈空泡樣或燒瓶樣改變，其內(nèi)部基質(zhì)嵴斷裂和脫落，排列欠緊密。見圖3B。M組:較IＲ組受損明顯減輕，細胞有一定程度皺縮或腫脹，細胞核內(nèi)可見染色質(zhì)點狀凝集，細胞質(zhì)密度較均勻，核膜較平滑，未見核固縮，碎裂和溶解;線粒體仍有一定程度的水腫，大多數(shù)嵴完整，排列較緊密，未見明顯內(nèi)部基質(zhì)嵴斷裂和脫落，見圖3C。圖3腦I/Ｒ后24h海馬CA1區(qū)透射電鏡結(jié)果(×12000)(黑白)Fig．3CellularmorphologyathippocampusCA1regionat24hoursafterI/Ｒundertheelectronmicroscope(×12000)3A:S24hsubgroup3B:IＲ24hsubgroup3C:M24hsubgroup3討論近年來，大量實驗研究發(fā)現(xiàn)，凋亡是腦I/Ｒ后神經(jīng)元細胞死亡的重要方式之一。大量研究同時也證實，在腦I/Ｒ過程中，半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)在caspase依賴的線粒體凋亡途徑中起著十分重要的作用［3］。在細胞

圖1腦I/Ｒ后海馬caspase-3蛋白免疫組化結(jié)果(SP×400)Fig．1Expressionofcaspase-3athippocampusCA1regionafterI/Ｒ(SP×400)1A:Expressionofcaspase-3inS24hsubgroup1B:Expressionofcaspase-3inIＲ24hsubgroup1C:Expressionofcaspase-3inM24hsubgroup圖2腦I/Ｒ后24h海馬CA1區(qū)光鏡結(jié)果(H-E×400)Fig．2CellularmorphologyathippocampusCA1regionat24hoursafterI/Ｒunderthelightmicroscope(H-E×400)2A:S24hsubgroup2B:IＲ24hsubgroup2C:M24hsubgroup2．3透射電鏡觀察S組海馬CA1區(qū)的超微結(jié)構(gòu)基本正常:神經(jīng)細胞核大小形態(tài)正常，呈橢圓形，核膜光滑，可見清晰的核仁，，胞質(zhì)內(nèi)可見大量正常的線粒體，胞質(zhì)密度均勻，內(nèi)可見大量排列密雜的嵴和基質(zhì)，見圖3A。IＲ組:神經(jīng)細胞破壞嚴(yán)重，染色質(zhì)聚集濃縮，核仁碎裂和邊移，核膜破壞，完整性和連續(xù)性中斷。胞質(zhì)排列紊亂，密度不均，線粒體水腫明顯，部分呈空泡樣或燒瓶樣改變，其內(nèi)部基質(zhì)嵴斷裂和脫落，排列欠緊密。見圖3B。M組:較IＲ組受損明顯減輕，細胞有一定程度皺縮或腫脹，細胞核內(nèi)可見染色質(zhì)點狀凝集，細胞質(zhì)密度較均勻，核膜較平滑，未見核固縮，碎裂和溶解;線粒體仍有一定程度的水腫，大多數(shù)嵴完整，排列較緊密，未見明顯內(nèi)部基質(zhì)嵴斷裂和脫落，見圖3C。圖3腦I/Ｒ后24h海馬CA1區(qū)透射電鏡結(jié)果(×12000)(黑白)Fig．3CellularmorphologyathippocampusCA1regionat24hoursafterI/Ｒundertheelectronmicroscope(×12000)3A:S24hsubgroup3B:IＲ24hsubgroup3C:M24hsubgroup3討論近年來，大量實驗研究發(fā)現(xiàn)，凋亡是腦I/Ｒ后神經(jīng)元細胞死亡的重要方式之一。大量研究同時也證實，在腦I/Ｒ過程中，半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)在caspase依賴的線粒體凋亡途徑中起著十分重要的作用［3］。在細胞
【作者單位】： 同濟大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院急診醫(yī)學(xué)科;同濟大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院護理部;
【分類號】：R741

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 Chun Luo;Su-yue Pan;;The pathways by which mild hypothermia inhibits neuronal apoptosis following ischemia/reperfusion injury[J];Neural Regeneration Research;2015年01期

2 Jian Lu;Yi Shen;Hui-yin Qian;Li-jun Liu;Bao-chun Zhou;Yan Xiao;Jin-ning Mao;Guo-yin An;Ming-zhong Rui;Tao Wang;Chang-lai Zhu;;Effects of mild hypothermia on the ROS and expression of caspase-3 m RNA and LC3 of hippocampus nerve cells in rats after cardiopulmonary resuscitation[J];World Journal of Emergency Medicine;2014年04期

3 陳勝;彭滬;莊育剛;陳艷清;張翔宇;;鹽酸法舒地爾對腦缺血再灌注損傷大鼠神經(jīng)細胞凋亡和細胞色素C釋放的影響[J];同濟大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2012年06期

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳勝;閔紅葉;周書琴;張中琳;江波杰;郭長峰;;亞低溫對腦缺血再灌注損傷大鼠神經(jīng)細胞凋亡和caspase-3釋放的影響[J];同濟大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2016年06期

2 張慧利;羅序睿;李愛蓮;;大鼠心肺復(fù)蘇后腦Occludin蛋白表達與血腦屏障及腦水腫的關(guān)系[J];中國醫(yī)藥;2016年11期

3 祝旺;時迎俊;;心跳驟停成功復(fù)蘇后亞低溫治療的研究[J];臨床醫(yī)藥文獻電子雜志;2016年45期

4 傅馬;羅時鵬;;局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠海馬區(qū)VEGF、HIF-1α以及Tau蛋白表達的影響[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)刊;2016年08期

5 王偉;葉U_發(fā);肖琦;;亞低溫在器官質(zhì)量保護中的應(yīng)用[J];武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2016年04期

6 盧孔渺;潘曙明;;自吞噬在神經(jīng)細胞缺血性損傷中的作用及其與凋亡和壞死的關(guān)系[J];中華急診醫(yī)學(xué)雜志;2016年06期

7 張堅;侯金超;徐孟龍;方向明;;S1PR3激動劑KRX-725促進細菌清除影響膿毒癥小鼠預(yù)后[J];中華急診醫(yī)學(xué)雜志;2016年01期

8 趙建祥;于榮國;王開宇;龔書榕;葉勇;張穎蕊;李小燕;;Beclin-1與LC3在膠質(zhì)瘤細胞C6自噬中的相關(guān)性[J];中華急診醫(yī)學(xué)雜志;2015年12期

9 李景棟;馮偉;許熙熙;任澤彬;;亞低溫治療ICU腦卒中病人的臨床體會[J];中國實用鄉(xiāng)村醫(yī)生雜志;2015年19期

10 錢會銀;朱建良;鄒勤華;周保純;趙旭明;陸件;劉勵軍;;治療性低溫對心臟驟�；颊呱窠�(jīng)功能預(yù)后和存活率影響的Meta分析[J];中華急診醫(yī)學(xué)雜志;2015年09期

【二級參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 檀榮方;夏愛華;吳曉光;曹娜娜;李蒙蒙;張?zhí)禅?王義茹;岳志領(lǐng);;山楂葉總黃酮抑制慢性腦缺血模型大鼠腦組織神經(jīng)元的凋亡（英文）[J];中國組織工程研究;2014年49期

2 王一蓉;毛海峰;陳嘉勤;;虎紋捕鳥蛛毒素對腦缺血模型大鼠海馬腫瘤壞死因子凋亡通路的影響[J];中國組織工程研究;2014年36期

3 Xiao-ping Wang;Qing-ming Lin;Shen Zhao;Shi-rong Lin;Feng Chen;;Therapeutic benefits of mild hypothermia in patients successfully resuscitated from cardiac arrest:A meta-analysis[J];World Journal of Emergency Medicine;2013年04期

4 張振強;宋軍營;賈亞泉;李澎濤;潘彥舒;;腦缺血合并高脂血癥模型大鼠腦組織的病理改變[J];中國組織工程研究;2013年33期

5 張宇紅;汪錫金;葉民;陳玉娟;楊紅彥;劉學(xué)源;;黃連素抑制促炎癥因子生成保護多巴胺能神經(jīng)元[J];同濟大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2009年03期

6 薩其拉,李文彬,孫勇如;線粒體與細胞凋亡機制[J];國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊);2000年05期

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張順業(yè),孫宗全,劉立新,哈斯朝努;Carvedilol attenuates CPB-induced apoptosis in dog heart: regulation of Fas/FasL and caspase-3 pathway[J];Chinese Medical Journal;2003年05期

2 姚克,王凱軍,徐雯,孫朝暉,申屠形超,邱培瑾;Caspase-3 and its inhibitor Ac-DEVD-CHO in rat lens epithelial cell apoptosis induced by hydrogen in vitro[J];Chinese Medical Journal;2003年07期

3 鄭廣瑛,張成,李志剛;Early activation of caspase-1 after retinal ischemia and reperfusion injury in mice[J];Chinese Medical Journal;2004年05期

4 張曉華,李兆申,屠振興,許國銘,龔燕芳,滿曉華;Therapeutic effect of Caspase-1 inhibitor on liver injury in experimental severe acute pancreatitis[J];Journal of Medical Colleges of PLA;2004年02期

5 高慧;鄒麗;;The Effects of Magnesium Sulfate on Fetal Rats of FGR and the Expression of Caspase-3 in the Placenta of Maternal Rat[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)英德文版);2005年06期

6 屈軍樂;潘文良;趙伶羚;孫磊;王小平;陳同生;;蟾酥靈誘導(dǎo)細胞內(nèi)caspase-3活化特性熒光分析[J];深圳大學(xué)學(xué)報(理工版);2008年03期

7 ;Analysis of in vivo patterns of caspase 3 gene expression in primary hepatocellular carcinoma and its relationship to p21~(WAF1) expression and hepatic apoptosis[J];World Journal of Gastroenterology;2000年03期

8 徐人歡 ,劉靜 ,徐豐 ,江舸 ,謝青 ,周霞秋 ,金由辛 ,王德寶;Activity identification of chimeric anti-caspase-3 mRNA hammerhead ribozyme in vitro and in vivo[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2001年06期

9 黃偉;Caspase研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊;2001年04期

10 崔銀珠;Caspase抑制劑有望成為一類新藥[J];國外醫(yī)藥(合成藥 生化藥 制劑分冊);2002年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 Qiang Su;Lang Li;Yang-chun Liu;You Zhou;;Effect of metoprolol on myocardial apoptosis and caspase-9 activation after coronary microembolization in rats[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國心血管病學(xué)大會論文匯編[C];2013年

2 韓志君;蔣廷旺;唐裕杰;胡志德;孫懿;周曄;陳燕;谷明莉;鄧安梅;仲人前;;Caspase在原發(fā)性膽汁性肝硬化患者外周血單個核細胞的表達及其臨床意義[A];全國臨床免疫檢驗研討會暨第六屆全國臨床免疫學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

3 葉月芳;周韌;;漢族人群caspase-10基因中可能存在一個新的微衛(wèi)星位點[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2005年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2005年

4 ;Effect of atorvastatin on myocardial apoptosis and caspase-8 activation following coronary microembolization[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

5 ;The Effect of Theanine on the Expression of Survivin,Bax,Caspase-3 in the Hippocampus and the Ability of Spatial Learning and Memory after Global Cerebral Ischemia /Reperfusion in Rats[A];全國第三次麻醉藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2012年

6 Ki Seong Eom;Gil-Saeng Jeong;Tae Young Kim;;Ophiobolin B inhibits proliferation of glioblastoma U87MG cells by inducing S phase arrest and caspase-dependent apoptosis[A];中國抗癌協(xié)會神經(jīng)腫瘤專業(yè)委員會第八屆學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

7 鄧常清;唐映紅;李花;陳北陽;陳瑞芬;;補陽還五湯有效部位對局灶性腦缺血再灌注后caspase表達的作用[A];第六次全國中西醫(yī)結(jié)合血瘀證及活血化瘀研究學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2005年

8 鄭世營;葛錦峰;趙軍;蔣東;紀(jì)勇;邵峰;;Caspase活化的細胞凋亡在老年非小細胞肺癌組織中的表達[A];第八屆華東六省一市胸心血管外科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

9 吳小候;李俊;;Expression of TRAIL and caspase 3 and their significance in rat’s renal ischemia-reperfusion injury[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

10 朱秋華;江煥峰;李佳;劉叔文;;新型Caspase-3抑制劑二氫吡咯衍生物的研究[A];第十屆全國抗炎免疫藥理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 一帆;caspase—8缺陷導(dǎo)致免疫紊亂[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張放;阻斷NLRP3炎癥小體中Caspase-1活化治療小鼠急性胃潰瘍的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 程進;蛋白激酶C在腫瘤再增殖中的作用及作用機制研究[D];上海交通大學(xué);2014年

3 唐楊順;Caspase-1在熱驚厥發(fā)生中的作用及以Caspase-1為靶點的新型小分子抑制劑研究[D];浙江大學(xué);2016年

4 胡瑩;瀉火化瘀通竅法對耳蝸IRI模型大鼠Caspase-9/6及Bax/Bcl-2影響的實驗研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2016年

5 楊杰凌;三型分泌系統(tǒng)針狀蛋白和梭菌大毒素激活炎癥小體的分子機制[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

6 賽佳明;慢病毒GV115-Survivin轉(zhuǎn)染反分化椎間盤髓核細胞的生物學(xué)效應(yīng)以及GV115-Caspase3 siRNA的構(gòu)建及其生物學(xué)效應(yīng)[D];青島大學(xué);2016年

7 張曉芳;體內(nèi)外研究CXCL1誘導(dǎo)以caspase-3為依賴的微管相關(guān)蛋白Tau的剪切[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2016年

8 謝金鑫;豬瘟病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS5A切割的機制研究[D];吉林大學(xué);2016年

9 林居強;細胞凋亡過程中caspase蛋白酶激活的光學(xué)成像研究[D];華中科技大學(xué);2006年

10 楊銳;硬脂酰酪氨酸對非caspase依賴的細胞損傷的神經(jīng)保護作用及其機制研究[D];上海交通大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 薛子成;樺木酸及其衍生物與Caspase-3分子對接及分子動力學(xué)研究[D];哈爾濱理工大學(xué);2014年

2 臧韻;TTF1-NP通過活化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的Caspase通路抑制大鼠原發(fā)性肝癌的生長[D];延邊大學(xué);2015年

3 胡麗華;四氯苯醌激活Caspase 8/t-Bid誘導(dǎo)PC12細胞凋亡的信號通路分析[D];西南大學(xué);2015年

4 董娜;Nestin和活化型caspase-3在狼掩性腎炎腎小球中的表達及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 常貫超;klotho蛋白、Caspase12蛋白在糖尿病腎病中的表達及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 徐彥楠;異牛肝菌素誘導(dǎo)人胃癌細胞BGC-823凋亡的機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 武辰楠;沙利度胺對人真皮成纖維細胞Caspase-3、Bcl-2和BAX mRNA的表達影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 陳素艷;不同時間和濃度的常壓氧對大鼠腦缺血半暗帶細胞凋亡的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

9 閆文相;Nrf2、Caspase3在人腦膠質(zhì)瘤中的表達及相關(guān)性[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 劉麗;失僂剌知丸對腦缺血大鼠再灌注后Caspase-3和Caspase-9表達的影響[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

本文編號：2545998