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慢病毒介導(dǎo)的調(diào)節(jié)因子X(jué)Ⅰ過(guò)表達(dá)及其對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制作用

發(fā)布時(shí)間:2017-12-26 15:12

  本文關(guān)鍵詞:慢病毒介導(dǎo)的調(diào)節(jié)因子X(jué)Ⅰ過(guò)表達(dá)及其對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制作用 出處:《中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2016年11期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的:構(gòu)建調(diào)節(jié)因子X(jué)1(regulatory factor X1,RFX1)過(guò)表達(dá)慢病毒載體,并觀察其對(duì)F98細(xì)胞增殖的影響。方法:運(yùn)用PCR技術(shù)擴(kuò)增RFX1,并將其插入慢病毒空載體質(zhì)粒p ITA,構(gòu)建p ITA-RFX1慢病毒質(zhì)粒,經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳和測(cè)序鑒定正確。將包裝慢病毒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,然后感染F98細(xì)胞。利用Western印跡和激光共聚焦驗(yàn)證RFX1過(guò)表達(dá)情況,用流式細(xì)胞儀和CCK-8試劑盒觀察轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞增殖情況。結(jié)果:電泳和測(cè)序顯示慢病毒載體p ITA-RFX1構(gòu)建成功,將其感染F98細(xì)胞后過(guò)表達(dá)RFX1蛋白,同時(shí)可以明顯抑制細(xì)胞的增殖。結(jié)論:過(guò)表達(dá)慢病毒載體構(gòu)建成功,上調(diào)RFX1可以降低惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖。
【作者單位】: 山西醫(yī)科大學(xué)汾陽(yáng)學(xué)院生物化學(xué)教研室;北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部干細(xì)胞中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81272790) 山西醫(yī)科大學(xué)汾陽(yáng)學(xué)院科技發(fā)展基金(2016B05)~~
【分類號(hào)】:R739.41
【正文快照】: Methods:Huamn RFX1 gene was amplifi ed by polymerase reaction.Gene amplifi cation productswere inserted into lentivirus vector p ITA,and the lentivirus vector p ITA-RFX1 was constructed.Th e constructed vector was verifi ed by agarose gel electrophoresis

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本文編號(hào):1337709

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