三氧化二砷對皮膚T細胞淋巴瘤Hut-78細胞株P(guān)ML異構(gòu)體及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達影響的研究
發(fā)布時間:2018-05-23 09:20
本文選題:T細胞淋巴瘤 + Hut-78細胞株 ; 參考:《昆明醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文
【摘要】:目的:通過檢測不同濃度三氧化二砷(ATO)對人皮膚T細胞淋巴瘤Hut-78細胞株的誘導(dǎo)凋亡作用、細胞周期及hTERT、PML、PML-Ⅰ、PML-Ⅳ和PML-V基因表達的影響,探討上述基因在ATO誘導(dǎo)人皮肽T細胞淋巴瘤凋亡過程中的作用及可能機制。 方法:本課題采用PI單標記流式細胞術(shù)檢測不同濃度的ATO,作用不同時間后,對人皮膚T細胞淋巴瘤Hut-78細胞株的誘導(dǎo)凋亡作用及對細胞周期的影響;采用RT-PCR方法檢測不同濃度的ATO,作用不同時間后,對人皮膚T細胞淋巴瘤Hut-78細胞株hTERT、PML、PML-Ⅰ、PML-Ⅳ及PML-Ⅴ基因表達變化的影響。 結(jié)果:1、以2-10μmol/L濃度的ATO分別干預(yù)Hut-78細胞24、48、72小時,流式細胞儀分析各期細胞占細胞周期的比例及細胞凋亡(壞死)比率,結(jié)果示ATO干預(yù)后被阻滯于G2/M期的細胞隨著ATO作用時間及濃度的增加比例逐漸增加,10μmol/L作用72小時時G2/M期比例最高,隨藥物濃度的增加及作用時間延長,Hut-78細胞的凋亡(壞死)比率逐漸增加;2、在ATO 2、5、10μmol/L三組濃度的作用下,用RT-PCR方法檢測不同作用時間下Hut-78細胞hTERT、PML、PML-Ⅰ、PML-Ⅳ及PML-Ⅴ基因表達水平,結(jié)果示:(1)隨著ATO濃度和作用時間的增加,hTERT mRNA的表達水平逐漸降低;(2)在不同濃度ATO作用48 h后PML的表達增加至最高,從48h至72h則逐漸降低;(3)在2umol/L 10umol/L和的ATO作用下,隨著作用時間的延長,PML-I的表達逐漸增加;在對照組和5umol/L的ATO作用下,從24h至48h之間,隨著時間延長,表達逐漸減少,而從48h至72h之間,則隨著時間延長,表達逐漸增加;(4)在不同濃度ATO作用后,在24h至48h之間,隨著時間延長,PML-IV的表達逐漸增加,在48至72h之間,隨著時間延長,表達逐漸減低;(5)在對照組和2umol/L的ATO作用后,隨著時間延長,PML-V的表達無明顯變化;在5umol/L和10umol/L的ATO作用后,隨著時間延長,表達逐漸增加,其中10umol/L的ATO作用后,PML-V表達量的增加趨勢最大;3、PML-Ⅳ表達與hTERT基因的表達之間無相關(guān)性。 結(jié)論:1、在一定濃度范圍內(nèi),ATO對Hut-78細胞存在增殖抑制作用,其增殖抑制作用在一定程度上可能與下調(diào)hTERT的表達有關(guān);2、ATO可誘導(dǎo)Hut-78細胞發(fā)生凋亡,凋亡主要發(fā)生在G2/M期,其凋亡作用可能與PML、PML-I及PML-IV的表達增高及下調(diào)端粒酶活性有關(guān);3、ATO對Hut-78細胞的誘導(dǎo)凋亡作用呈顯著的時間一劑量依賴性;4、不同濃度范圍的ATO對Hut-78細胞PML-V基因的表達影響不同,推測]PML-V只有在藥物強應(yīng)激情況下,表達才會激增。
[Abstract]:Objective: to investigate the effects of different concentrations of arsenic trioxide (ATO) on apoptosis, cell cycle and the expression of PML- 鈪,
本文編號:1924149
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